Zusammenfassung der Ressource
Generalidades de la
producion de embriones
bovinos en vitro
- Historia: en 1920 ensayos en conejos, primer
nacimiento en 1950 Bovinos: en la Década de los 70,
primer nacimiento principio de los años 80.
- Es una biotecnologia reproductiva
mejoramiento genetico
- Por la cual se obtienen Embriones en laboratorio, que
pueden ser implantados en Útero de la hembra bovina
- La colecta de oocitos puede ser
por: Aspiracion floicular por
ultrasonido, Laparoscopia via flanco
Laparotomia ventral o medial
- tiene diferentes fases:
- Sistemas de cultivo celular
- Medios indefinidos
- Contiene suero fetal
bovino: Que proporciona
nutrientes a los
embriones
- El problemas mas frecuente al
utilizar suero fetal bovino. los
embriones sufren alteraciones
ultra estructurales , Síndrome
de ternero grande
- Co cultivos con celulas somaticas,
que contribuyen al desarrollo
embrionario al remover sustancias nocivas
- Medios semidefinidos
- son medios donde no hay
co-cultivos y el Suero Fetal Bovino es
remplazado con albúmina sérica
bovina
- La albúmina es una de las proteínas con
mayor presencia en el tracto reproductivo
de los mamíferos y se cree que tiene un
importante papel en la nutrición del
embrión
- Medios definidos
- Son sistemas libres de proteínas, donde la
Albumina Sérica Bovina es remplazada por
macromoléculas como el polivinil alcohol y
polivinilpirrolidona
- Uso comercial limitado, en
investigacion
- Maduración de oocitos in vitro
- Las características
microscópicas del folículo
son importantes para
determinar el potencial de
maduración nuclear y
citoplasmática del oocito
- Clasificaciones morfologicas
- Calidad 1: cumulus compacto
presente, conteniendo más de
tres capas de células
- Calidad 2: cumulus compacto
parcialmente presente con menos de
3 capas de células
- Calidad 3: cumulus presente, pero expandido.
Citoplasma contraído con espacio entre la membrana
- Calidad 4: oocito desnudo sin
células del cumulus
- Capacitación espermática
- Este proceso ocurre en el tracto genital de la hembra
por la remoción de los factores decapacitantes debido
a las interacciones que se establecen entre el
espermatozoide y los factores capacitantes
- Preaparacion espermatica para la FIV
- las técnicas mas utilizada en Separación de
espermatozoides son
- swin up: os espermatozoides vivos son separados
de los muertos, del plasma seminal y de los
componentes diluyentes, por la motilidad
ascendente
- Gradientes de percoll: el semen se centrifuga, pasándolo
por diferentes gradientes de concentración, para permitir
la separación de los espermatozoides vivos de los demás
constituyentes del semen, basándose en la diferencia de
densidades
- Lavado expermatico
- Fertilización in vitro de oocitos (FIV)
- se debe proporcionar un ambiente apto
para que ocurra la capacitación
espermática y la fecundación
- el medio más utilizado es el FERT, que
contiene heparina para la capacitación
espermática.
- El co-cultivo (espermatozoides-oocitos) es realizado por un período ente
18 y 22 horas, a una temperatura de 39ºC, en una atmósfera de 5% de CO2
- Cultivo de embriones in vitro (CIV)
- los oocitos fertilizados son sometidos a la etapa de cultivo. El
objetivo de esta etapa es permitir que, los oocitos fertilizados se
desarrollen hasta un estadio embrionario en el que se pueda
realizar la transferencia a la receptora.