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Es la introducción de un fragmento de ADN denominado inserto dentro de una molécula de ADN denominada vector, que puede replicarse de manera autónoma e independiente del genoma de la célula hospedera:
Se define como una molécula de ADN de doble cadena (DNAds), con capacidad de albergar un fragmento de ADN exógeno (de otro origen).
Como se clasifican los vectores:
Su finalidad es el almacenamiento de secuencias y la obtención de grandes cantidades del ADN insertado o de la molécula recombinante
Son aquellos cuyo objetivo es producir un tránscrito (ARN) o la proteína producto de ese tránscrito.
Elementos que forman un vector de clonación:
Como se le llama a la introducción de un vector a una célula eucariota
Es una colección de fragmentos de ADN, provenientes del genoma de un organismo, clonados en vectores para facilitar su estudio
Se definen como aquellos que han sido manipulados genéticamente, insertando un gen que no forma parte natural de su genoma (transgén), con la finalidad de que se incorpore de manera estable, para que pueda heredarse
Se refiere a un gen que es insertado en un genoma o vector genético
¿Qué es un vector?
¿Cuál es la finalidad de un vector de clonación?
¿Qué son los vectores de expresión?
Son una herramienta básica en clonación e ingeniería genética; se utilizan entre otros fines para hacer mapas de restricción de plásmidos o genomas.
Son las enzimas que modifican a los ácidos nucleicos, ya que son capaces de cortar los enlaces fosfodiester que unen los nucleótidos de una cadena de ácidos nucleicos.
Como se les denomina a las nucleasas que son capaces de cortar el enlace fosfodiester en nucleótidos localizados dentro de la cadena de ácidos nucleicos.
Como se les denomina a las nucleasas que son capaces de cortar el enlace fosfodiester en nucleótidos localizados en los extremos de la cadena de ácidos nucleicos.
Las enzimas de restricción, que tipo de actividad presentan y de qué origen son.
Como se le conoce a la secuencia de ADN donde son cortados los enlaces fosfodiester por la enzima de restricción.
Este tipo de enzimas de restricción reconocen una secuencia especifica de nucleótidos y hacen un corte aleatorio en la doble cadena en cualquier secuencia del ADN y a una distancia de 1000 pb del sitio de corte.
Este tipo de enzimas de restricción reconocen una secuencia especifica de nucleótidos y hacen el corte de la doble cadena de ADN en el mismo sitio de reconocimiento.
Este tipo de enzimas de restricción reconocen una secuencia especifica de nucleótidos y cortan el ADN de doble cadena fuera de la secuencia diana.
Como se les conoce a los cortes que se generan, porque la enzima corta en cada cadena de ADN entre nucleótidos localizados en posiciones diferentes respecto al eje de simetría de la secuencia diana.
Como se les conoce a los cortes que se generan, porque la enzima corta en ambas cadenas de ADN sobre un mismo eje.
Se define como la serie de fragmentos que se generan por el corte con determinadas enzimas, específicos en tamaño y que permiten emplearlos para la caracterización de dicho ADN.
Son las enzimas de restricción obtenidas de diferente especie bacteriana pero que reconocen la misma secuencia diana de ADN y cortan entre diferentes nucleótidos de dicha secuencia.
Es un conjunto ordenado de genes en una pequeña superficie (10,000 muestras por cm2) el fundamento de esta técnica se basa en la hibridación de ácidos nucleicos y su detección por fluorescencia mediante análisis de imagen
¿técnica ampliamente usada por su economía y facilidad, además permite buen aislamiento del ADN de buena calidad?
¿a qué temperatura deben de conservarse los reactivos y muestras, antes, después y durante el proceso?
¿Cuáles son los métodos de cuantificación de los ácidos nucleicos más utilizados?
¿se lleva a cabo para desarrollar estudios de expresión génica para el diagnóstico de enfermedades por virus de ARN o validar la clonación del ADN?
¿sirve para la purificación de ambos ácidos nucleicos, aunque su uso principal en el aislamiento del ADN genómico y plasmático?
¿a qué temperatura el ácido nucleico se debe de mantener hasta su empleo?
Es la posición física donde se ubica un gen en el genoma?
Se utilizan como marcadores genéticos para identificar o relacionar a personas?
Estos polimorfismos pueden estar representados por la deleción, inserción o sustitución de una base nitrogenada en la secuencia nucleotídica normal.
Este tipo de polimorfismos se evidencian mediante el uso de enzimas de restricción, que cortarán determinadas secuencias de ADN.
Cuando un individuo tiene diferentes formas alelicas en el locus se dice que es:
Se le denomina así a la combinación de secuencias en los alelos que se heredan y es única para cada descendiente; el análisis de sus polimorfismos permite obtener un patrón diferente para cada uno.
Polimorfismo que es distintivo en el gen MTHRF y genera una enzima termolábil menos activa. Además, produce enfermedad cardiovascular por su baja concentración de folato en plasma:
Este método permite identificar a individuos de acuerdo con parentescos por línea materna, ya que todos los hermanos comparten la misma información en su ADN miocondrial:
Tipo de polimorfismo que consiste en bases insertadas o suprimidas:
Polimorfismo útil para la diferenciación de isoenzimas en el citoplasma celular mediante la diferenciación de mutaciones no sinónimas de ADN:
Se define como la transferencia o introducción de material genético a una célula eucariota con el propósito de alterar el curso de una enfermedad o corregir una alteración metabólica o genética.
Manipulación genética que consiste en insertar un gen funcional que exprese la proteína terapéutica en el tejido indicado.
Tiene el objetivo de disminuir o anular la expresión de algún gen o genes a través de ARN de ARNi, oligonucleótidos o ribozimas.
Tipo de terapia génica que consiste en la introducción directa del gen terapéutico al torrente sanguíneo del paciente que llegará al órgano blanco.
Terapia génica que trata de una microinyección que introduce el ácido nucleico directamente a la célula, para lograr la obtención de organismos recombinantes.
Se le denomina así a la transferencia de genes por un vector viral.
Se le denomina así a la transferencia de genes por un sistema no viral.
Es el método para la transfección de células vegetales, que se le conoce como pistola de genes y consiste en el uso de aparato de balística que dispara macropartículas de oro, rodeadas de ADN plasmidico.
Esta técnica se basa en el uso de moléculas lipídicas de carga neta altamente positiva que interactúan con el esqueleto fosfatado de la molécula de ADN.
Consiste en la inyección directa de ADN en el núcleo celular mediante una microjeringa y un micromanipulador para introducir el material genético a una célula blanco.
Mecanismo que involucra el empleo de secuencias de ARN de doble cadena para un gen específico, con la finalidad de bloquear su expresión:
La transferencia de genes por un vector viral se denomina:
Vehículos utilizados para la transferencia de genes a células somáticas:
Todos son virus que se utilizan como vectores en la terapia génica, excepto:
Son virus de doble cadena de ADN, de la familia Herpesviridae, el género más usado como vector es Simplexvirus:
Tipo de virus que tiene la ventaja de generar baja respuesta inmune:
¿Conjunto de pares de bases contenidas en el ADN de cada organismo?
Contiene la información necesaria para el diseño de las estructuras celulares y para todas las funciones que realizan las células.
Permite la predisposición de las personas a desarrollar ciertas enfermedades.
¿Cuáles fueron los motivos que propiciaron el Proyecto del Genoma Humano?
¿Por qué el genoma humano se considera patrimonio de la humanidad?
Mencione las principales aportaciones del Proyecto del Genoma Humano a la medicina.
¿Cuál es el problema de realizar las pruebas diagnosticas basadas en el análisis del ADN?
¿Cuál es la ventaja de la terapia génica?
¿Cuál es el problema de crear organismos transgénicos?
Es un método de secuencia con que depende de la degradación química del ADN, tiene la ventaja que puede emplear ADN de doble hebra, requiere de fragmentación del mismo:
Etapas del método químico o de degradación de maxam y gilbert:
Modo de uso del método químico de maxam y gilbert:
Este proceso consiste en encontrar diferentes cadenas, tantas como número de bases tenga el fragmento que son copias de la cadena de ADN que se va a secuenciar, de tamaño diferente y con la incorporación de 2’ 3’ didesoxinucleótido:
Permite aumentar la velocidad de secuenciacion y faculta al investigador para analizar un gran grupo de fragmentos de ADN:
Sistema basado en el método enzimatico, que aprovecha la liberacin de pirofosfato cuando un nucleotido se incorpora en la hebra de ADN en crecimiento, mediante bioluminiscencia:
Es una herramienta que sirve para el entendimiento de las bases de los procesos celulares que definen la fisiología y el desarrollo:
Son utilizados para capear y cuantificar transcritos a partir de muestras biológicas:
¿Que constituyen los microarreglos?
¿En que se basa la hibridación genómica comparativa?
¿En qué campos se ha diseminado el uso de los microareglos?
La creación de perfi les genéticos por medio de polimorfismos se realiza con:
Según estas reglas el grado en el cual dos secuencias de ADN se complementen o emparejan se le llama homología.
método ideal para detectar polimorfismos en el ADN, ya que mediante el uso de sondas específicas para identificar secuencias repetidas (VNTR o STR), localiza regiones de hibridación homólogas a una secuencia de interés.
La PCR con enzimas de restricción y electroforesis permite localizar :
Puede tener más de dos copias del alelo activo, lo que produce enzimas altamente funcionales con actividad enzimática acelerada:
Gen que codifica para una glucoproteína de membrana clase 2 y se ha asociado con resistencia a la insulina.
Gen que es citocina con funciones biológicas diversas, incluida la respuesta inmune.
Permite determinar la distribución de los tipos microbianos en determinada población, su patogenicidad y resistencia a trata-mientos o inmunogenicidad.
Son comunes, los comparten 5 a 20% de las personas, lo que obliga a la búsqueda de combinaciones de loci en reacciones multiplex, para lograr un método adecuado de discriminación e identificación precisa:
sólo dan evidencia de probabilidad (mayor o menor) de que el patrón genético analizado sea homólogo o concuerde conel de una persona en particular:
¿Consiste en la migración proporcional de las moléculas a través de un gel u otro tipo de matriz porosa, según su peso molecular?
¿Es es un dispositivo que permite la generación de un campo eléctrico?
¿Para la separación de ácidos nucleicos se usan geles de?
¿Para la separación de proteínas se usan geles de?
¿Es un polisacárido extraído de algas marinas?
¿Es un polímero sintético, termoestable, incoloro y químicamente inerte?
Es el resultado de la polimerización química de una mezcla de acrilamida y bisacrilamida.
¿Proporciona el medio para la transmisión de la corriente eléctrica y mantiene el pH sin variaciones mientras se realiza el corrimiento?
¿Este amortiguador tiene como en brindar peso, densidad y color a la muestra?
¿Tipo de electroforesis en la que la totalidad del gel se cubre con buffer de corrimiento?
Empleada exclusivamente con gel de poliacrilamida, se utiliza para proteínas o ácidos nucleicos de pequeño tamaño.
¿Es método más común para la electroforesis de ADN?
¿Funciona como otro iniciador de polimerización?
Se aplica para la identificación de fracciones proteicas o proteínas particulares por tamaño, sobre todo, para la identificación de moléculas particulares?
Determina el genotipo de un individuo de acuerdo con los marcadores genéticos analizados
Se necesita identificar para establecer una huella genética
Es uno de los principales usos que tiene una huella genética
Se realiza con marcadores o regiones con patrones de repetición definida, para determinar el genotipo de un individuo
Nos sirve para identificar de forma temprana efectos secundarios a fármacos, incompatibilidad o resistencia a terapias y variación en la eficacia de medicamentos:
Según las reglas de Chargaff, el grado en el cual dos secuencias de ADN se complementan o emparejan es llamado:
Método que mediante el uso de sondas específicas permite identificar secuencias repetidas (VNTR o STR) o localizar regiones de hibridación homólogas a una secuencia de interés.
Es útil en la identificación de restos humanos, familiares extraviados, pruebas de paternidad, etc.
Se considera una de las técnicas más sensibles y específicas de las pruebas moleculares.
Esta técnica se basa en una replicación exponencial in vitro de una molécula de ADN genómico (ADNg) o ADN complementario (ADNc), mediante ciclos repetitivos, que constan de tres temperaturas. En cada uno de los ciclos las moléculas se duplican hasta que los reactivos se agotan.
Enzima más empleada para la PCR; tiene como función polimerizar una nueva cadena de ADN tomando como molde otra ya existente.
Actúa como cofactor de la ADN polimerasa y se suplementa a una concentración de entre 1.0 y 2.5 mM.
En qué dirección inicia la polimerización de la ADN polimerasa:
Definen el tamaño del fragmento que se ha de amplificar.
Los ciclos de amplificación del PCR constan de los siguientes pasos :
Permite el rompimiento de los puentes de hidrógeno entre las cadenas del ADN:
Proporciona las condiciones cinéticas favorables para la unión de los iniciadores con su secuencia complementaria.
En este paso del ciclo ampliaficacion del PCR la enzima polimeriza los dNTPs y forma la cadena complementaria basándose en el molde al cual hibridó el primer correspondiente.
Esta modalidad de PCR permite detectar la presencia o ausencia de un fragmento de ADN determinado:
Es aquella PCR en la que el producto se analiza después de 25 a 35 ciclos en el punto previo a la saturación de la reacción, mediante un gel de electroforesis:
En esta modalidad se realiza en una muestra de tejido embebida en parafina y permite saber qué tipo celular presente en un tejido expresa un determinado gen o cuál célula está infectada por un patógeno:
Permite conocer los niveles de expresión de un gen (ARNm) en particular, y normaliza los niveles encontrados de este gen con los encontrados en un gen de expresión constitutiva:
PCR en la cual se diseñan primers capaces de hibridar solamente en secuencias con presencia de una mutación, por lo que, en caso de estar ausente, no se produce un producto:
Ciclo elegido por el usuario de fase exponencial en donde la cantidad inicial de moleculas del gen de interes presentes en una muestra inversamente proporcional a la intensidad de flourescencia:
Esta puede utilizarse para determinar la expresion de los niveles de ARNm de un grupo de celulas o tejidos respecto a una referencia:
Procedimiento realizado con un gen control endógeno (constitutivo), para eliminar variabilidad entre muestra y muestra:
Esta tecnica es mas sensible y rapida que otras tecnicas de analisis de la exopresion de genes:
Cual es la transcriptasa inversa mas usada?
¿Es el equipo en el cual se realiza la PCR?
Es necesaria una temperatura de 95°C para la _____________________de la doble cadena de ADN, en el caso del ADN genómico, o el rompimiento de estructuras secundarias, en el ADNc.
¿consta de las tres temperaturas siguientes: 95°C: desnaturalización por unos 30 segundos, 55 a 60°C: alineación por 30 a 40 segundos y 72°C extensión?
En esta fase, la temperatura se encuentra en un rango entre 55 y 60°C, en el cual la mayoría de los iniciadores hibrida:
Se produce a la temperatura óptima para el funcionamiento de la ADN polimerasa empleada, por lo que dependerá ésta para la PCR. En el caso de la Taq polimerasa, la más utilizada es de 72°C:
¿Qué es la clonación?
¿Cuáles son las Técnicas utilizadas para producir embriones genéticamente idénticos?
¿Qué tipos de embriones se utilizan para la producción de gemelos idénticos mediante métodos microqururgicos?
¿Qué permite la Clonación por transferencia nuclear de células somáticas?
¿Qué tipos de células se utilizan en la clonación por transferencia nuclear de células somaticas?
¿Cómo se obtienen los llama animales Knock Out?
¿Quién logro el primer raton knock out?
¿Qué son los animales transgénicos?
