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Descripción
Mapa Mental por Paola Zambrano, actualizado hace más de 1 año
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Creado por Paola Zambrano
hace más de 6 años
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Tinción de Ziehl-Neelsen
- Técnica de tinción diferencial rápida y
económica, usada para la identificación de
bacterias ácido-alcohol resistentes (BAAR)
- Fue descrita por primera vez por dos médicos
alemanes: Franz Ziehl, un bacteriólogo, y
Friedrich Neelsen, un patólogo.
- Técnicas como esta requieren combinaciones de colorantes
con calor para fijar el primero a la pared celular.
- Luego viene un proceso de decoloración que permite
obtener dos resultados: resistencia o sensibilidad a la
decoloración por ácidos y alcoholes.
- Considerándose
- Ácido alcohol resistente positivos (AAR+)
- Microorganismos que se tiñan de un color rojizo
- Microorganismos que se tiñan de un color rojizo
- Acido alcohol resistente negativos (AAR-)
- Microorganismos que se tiñen de azul o verde, dependiendo
del colorante utilizado como contra-colorante
- Microorganismos que se tiñen de azul o verde, dependiendo
del colorante utilizado como contra-colorante
- Ácido alcohol resistente positivos (AAR+)
- Considerándose
- Luego viene un proceso de decoloración que permite
obtener dos resultados: resistencia o sensibilidad a la
decoloración por ácidos y alcoholes.
- El fundamento de esta técnica de tinción se basa en las propiedades de la
pared celular de estos microorganismos. La pared está formada por un tipo
de ácidos grasos llamados ácidos micólicos; estos se caracterizan por
presentar cadenas muy largas.
- Cuando los ácidos grasos presentan estructuras muy largas, estos
pueden retener los colorantes con mayor facilidad.
- Cuando los ácidos grasos presentan estructuras muy largas, estos
pueden retener los colorantes con mayor facilidad.
- Procedimiento
- 1. Preparar un frotis bacteriano
- 2. Calentar la muestra
- 3. Cubrir la mancha con la solución de carbol fucsina (color básico primario)
- 4. Calentar la mancha durante 5 minutos hasta que haya un
desprendimiento de vapor. Siendo importante no sobrecalentar ni quemar.
- 5. Lavar la mancha con agua limpia. Si el agua del grifo no está
limpia, lavar el frotis con agua filtrada o destilada, preferiblemente.
- 6. Cubrir el frotis con alcohol ácido. Este alcohol ácido debe estar al
3 %. Esto se lleva a cabo durante 5 minutos o hasta que el frotis esté
lo suficientemente decolorado, es decir, de color rosa pálido.
- 7. Lavar la mancha con agua limpia, destilada.
- 8. Cubrir el frotis con colorante azul de metileno (0,3 %) durante 1 o 2
minutos, utilizando el tiempo más prolongado si el frotis es delgado.
- 9. Lavar la mancha nuevamente con agua limpia.
- 10. Se debe limpiar la parte posterior del portaobjeto y colocar la mancha en un estante
de drenaje, para que esta se seque al aire (no usar papel absorbente para el secado).
- 10. Se debe limpiar la parte posterior del portaobjeto y colocar la mancha en un estante
de drenaje, para que esta se seque al aire (no usar papel absorbente para el secado).
- 9. Lavar la mancha nuevamente con agua limpia.
- 8. Cubrir el frotis con colorante azul de metileno (0,3 %) durante 1 o 2
minutos, utilizando el tiempo más prolongado si el frotis es delgado.
- 7. Lavar la mancha con agua limpia, destilada.
- 6. Cubrir el frotis con alcohol ácido. Este alcohol ácido debe estar al
3 %. Esto se lleva a cabo durante 5 minutos o hasta que el frotis esté
lo suficientemente decolorado, es decir, de color rosa pálido.
- 5. Lavar la mancha con agua limpia. Si el agua del grifo no está
limpia, lavar el frotis con agua filtrada o destilada, preferiblemente.
- 4. Calentar la mancha durante 5 minutos hasta que haya un
desprendimiento de vapor. Siendo importante no sobrecalentar ni quemar.
- 3. Cubrir la mancha con la solución de carbol fucsina (color básico primario)
- 2. Calentar la muestra
- 1. Preparar un frotis bacteriano
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