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Transformación bacteriana
Description
Diagrama de flujo laboratorio #13. Biologia celular y molecular 2 UdeA
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medio lb
colonia bacteriana
Flowchart by
Fredy Romero Menco
, updated more than 1 year ago
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Created by
Fredy Romero Menco
over 6 years ago
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Resource summary
Flowchart nodes
TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
DIA 1
DIA 2
En un tubo eppendorf de 3 ml colocar alrededor de 200 µl de células competentes Escherichia coli DH5α
Adicione 20 µl del ADN a introducir en la bacteria
Mezclar cuidadosamente por inmersion e incubar en hielo por 20 min
Dar un choque térmico incubando a 42°C, de 30 - 60 "
Transferir inmediatamente a un baño de hielo por 10 min
Adicionar 1 ml de medio LB liquido
Incubar a 37 °C con agitación continua durante una hora
Plaquear en medio LB sólido que contiene antibiotico de selección apropiado (Kanamicina)
Cultivar las bacterias en caja de Petri, boca abajo, toda la noche, en incubadora a 37 °C
Observar directamente los resultados en las cajas de Petri
Determinar el número de unidades formadoras de colonia
Unidades Formadoras de Colonia (UFC). Unidad formadora de colonia por centimetro cuadrado. Unidades formadoras de colonia por ml.
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