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Descripción
Mapa Mental por Alison Tejena, actualizado hace más de 1 año
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Creado por Alison Tejena
hace más de 6 años
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Tinción de Gram
- Procedimiento
- Como primer paso tendremos la obtención de la
muestra, la cual será a través de un exudado
faringeo.
- Una vez obtenida la muestra
procedemos a pasar el hisopo en el
portaobjeto.
- Luego procedemos a fijar la muestra, lo que haremos es pasar varias
veces nuestro portaobjeto encima de un mechero, hasta que notemos que
nuestra muestra esta fijada.
- Una vez fijada la muestra, procedemos a realizar la tinción,
para esto necesitaremos: cristal violeta, colorante lugol,
alcohol - acetona, agua destilada y colorante safranina.
- 1. Entonces, primero añadimos el cristal violeta (el cual
tiene afinidad con el peptidoglucano de la pared
bacteriana) encima de nuestra muestra por 1 minuto.
- 2. Luego que pase el tiempo asignado, tenemos
que echar agua destilada a la placa para que
limpie el sobrante de nuestro colorante.
- 3. Posteriormente añadimos el colorante lugol (el cual sirve como
mordiente e impide la salida del cristal violeta por la formación de
un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios del
peptidoglucano de la pared bacteriana) por 1 minuto.
- 4. Agua destilada nuevamente.
- 5. Luego añadimos el alcohol - acetona (la cual deshidrata la pared
bacteriana y cierra los poros de la misma, también destruye la
membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a que
ésta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla
de alcohol - acetona) por 10 o 15 segundos.
- 6. Agua destilada
- 7. Por último agregar safarina (la cual funciona como un colorante
secundario o de contratinción y sirve para teñir las bacterias que no
pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo) por 1 minuto.
- 8. Después lavamos con agua destilada y dejamos secar para
posteriormente visualizar en el microscopio, pero antes de
observar, tenemos que añadir 1 o 2 gotas de aceite de
inmersión y así podremos observar con el lente de 100x.
- 8. Después lavamos con agua destilada y dejamos secar para
posteriormente visualizar en el microscopio, pero antes de
observar, tenemos que añadir 1 o 2 gotas de aceite de
inmersión y así podremos observar con el lente de 100x.
- 7. Por último agregar safarina (la cual funciona como un colorante
secundario o de contratinción y sirve para teñir las bacterias que no
pudieron retener el complejo cristal violeta-yodo) por 1 minuto.
- 6. Agua destilada
- 5. Luego añadimos el alcohol - acetona (la cual deshidrata la pared
bacteriana y cierra los poros de la misma, también destruye la
membrana externa de las bacterias Gram negativas debido a que
ésta es soluble a la acción de solventes orgánicos, como la mezcla
de alcohol - acetona) por 10 o 15 segundos.
- 4. Agua destilada nuevamente.
- 3. Posteriormente añadimos el colorante lugol (el cual sirve como
mordiente e impide la salida del cristal violeta por la formación de
un complejo cristal violeta-yodo que satura los espacios del
peptidoglucano de la pared bacteriana) por 1 minuto.
- 2. Luego que pase el tiempo asignado, tenemos
que echar agua destilada a la placa para que
limpie el sobrante de nuestro colorante.
- 1. Entonces, primero añadimos el cristal violeta (el cual
tiene afinidad con el peptidoglucano de la pared
bacteriana) encima de nuestra muestra por 1 minuto.
- Una vez fijada la muestra, procedemos a realizar la tinción,
para esto necesitaremos: cristal violeta, colorante lugol,
alcohol - acetona, agua destilada y colorante safranina.
- Una vez obtenida la muestra
procedemos a pasar el hisopo en el
portaobjeto.
- Como primer paso tendremos la obtención de la
muestra, la cual será a través de un exudado
faringeo.
- Se considera básica para la detección de
muestras para análisis bacteriológicos.
- Las muestras útiles para su uso son líquidos estériles,
biopsias para cultivos, abscesos, hisopados, etc.
- Un microorganismo gram positivo debe presentar una pared celular sana,
ya que si el mismo microorganismo sufre daño de la pared por una u
otra causa, se vuelve gram negativo.
- Está puede proporcionar información rápida para diagnósticos
de infecciones,. También hacer posible distinguir entre
contaminación de la muestra y una verdadera infección
- Actualmente la Tinción de Gram sigue siendo un método
eficaz e importante en el laboratorio, además de que es
rápido y económico.
- Los principios de la tinción de Gram están basados en la características
de la pared celular de las bacterias, la cual le confiere propiedades
determinantes a cada microorganismo.
- Fue desarrollada por el
bacteriólogo danés Hans
Christian Gram en 1884.
- Es definida como una tinción diferencial, ya que utiliza dos
colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes grupos:
- Gram Negativa
- La pared celular de las bacterias gram negativas
está constituida por una capa fina de
peptidoglucano y una membrana celular externa.
- Se observa en el microscopio de
color rosa o fucsia.
- Se observa en el microscopio de
color rosa o fucsia.
- La pared celular de las bacterias gram negativas
está constituida por una capa fina de
peptidoglucano y una membrana celular externa.
- Gram Positiva
- Las bacterias gram positiva poseen una pared
celular gruesa constituida por peptidoglucano,
pero no cuentan con membrana celular externa.
- Se observan en el microscopio
de color violeta.
- Se observan en el microscopio
de color violeta.
- Las bacterias gram positiva poseen una pared
celular gruesa constituida por peptidoglucano,
pero no cuentan con membrana celular externa.
- Gram Negativa
- No todas las bacterias se pueden teñir por esta técnica, ya que carecen de pared
celular (micoplasma) o su pared celular tiene una composición química diferente
(micobacterias).
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