Este método microbiológico permite identificar
enterobacterias y otras bacterias gramnegativas, procedentes
de muestras clínicas o de cualquier otro origen.
Metodología
1. Coger un tubo EnteroPluri®-Test y anotar en él: nombre de
identificación de la muestra a identificar, la fecha de realización
del test y otras informaciones que considere necesarias.
11. Desenroscar ambos tapones (rojo y azul) del EnteroPluri®-Test.
111. Con el extremo de la aguja correspondiente recoja una
colonia bien aislada del medio de cultvo.
IV. Inocular el EnteroPluri®-Test, estirando la aguja por el extremo opuesto, girando a la
vez la aguja de inoculación a través de los pocillos del panel para una perfecta
inoculación. Reinsertar nuevamente la aguja hasta la muesca de fractura que aparece
grabada y con un movimiento de torsión romper la aguja de inoculación por la muesca.
V. La parte de la aguja que queda dentro del panel mantiene las
condiciones anaerobias necesarias para las reacciones de la glucosa/del
gas, de la lisina y de la ornitina de los diferentes sectores.
VI. Antes de desecharla, utilizar el trozo de aguja cortada de la aguja para
perforar la película plástica en los sectores adonitol, lactosa, arabinosa,
sorbitol, VP, Dulcitol/PA, urea y citrato, para crear las condiciones aeróbicas.
VII. Cerrar otra vez ambos extremos con los tapones e incubar el
EnteroPluri®-Test a 36°C ± 1°C durante 18-24 horas, colocándolo
verticalmente en una gradilla o bien en una superficie plana.
VIII. Anotar los resultados obtenidos en la hoja de datos, para la
obtención del código numérico de interpretación, excepto la prueba
del Indol y de Voges-Proskauer.
IX. Inyectar con una jeringuilla 3 ó 4 gotas del reactivo de Kovac en el sector
H2S/Indol. Igualmente inyectar 3 gotas del alfa-naftol y 2 gotas del
hidróxido de potasio en el sector VP.
X. Completar el código de 5 dígitos siguiendo las instrucciones e
identificar finalmente la bacteria usando el Libro de Códigos.
Interpretación
Una vez finalizada la incubación, se observa el cambio de color de los medios de los
distintos sectores. A continuación, se pueden interpretar los resultados con la ayuda de
la siguiente tabla:
RAPID ONE SYSTEM
Principio
Es un micrométodo cualitativo que utiliza sustratos
convencionales y cromogénicos para la identificación de
microorganismos
Metodología
Interpretación
API 20E
Fundamento
Establecer la metodología en la identificación de
enterobacterias por medio de pruebas bioquímicas
estandarizadas y miniaturizadas.
Metodología
Interpretación
Pasado el tiempo de incubación consultar el Cuadro 1, para la adición de reactivos en los
tubos respectivos y para la interpretación de resultados. Consultar el Cuadro 2 para
obtener un número de identificación característico para cada especie. Consultar la Tabla
de identificación del sistema API 20E (API 20E Analytical Profile Index, Bio-Mériux
2019) o el software APILAB (Bio-mériux), para determinar el género y la especie de la
cepa aislada (En caso de no contar con la bibliografía mencionada, se podrá consultar el
Bergey’s Manual para la identificación de la cepa aislada con base en los resultados de
las pruebas bioquímicas).
SISTEMA
UNI-YEAST-TEK (REMEL)
Fundamento
Está constituído por una placa plástica con múltiples compartimientos que contiene
un medio con agar para la asimilación diferencial de siete hidratos de carbonos.
Metodología
1. A partir de un cultivo de 24-48 h en medios habituales, realizar una suspensión en agua
destilada estéril equivalente a 4 McFarland. Inocular cada uno de los compartimentos con
una gota de esta suspensión.
11. El compartimiento con agar harina de maíz se siembra, con una pequeña porción de la colonia, haciendo dos o
tres surcos paralelos con aguja de inoculación. Seguidamente, se coloca un cubreobjeto flameado sobre el área
inoculada.
111. Incubar a 30-35 °C durante 2-7 días
Interpretación
La observación de cambio de color del azul al amarillo indica
asimilación de los hidratos de carbono.
El medio de nitrato se interpreta como reducción cuando el color azul original vira
al color verde o verde azulado.
La detección de hifas, blastosporas y clamidosporas en el agar harina
de maíz se detecta mediante visualización con objetivo de 40X.
API-20C AUX
(BIOMERIEUX)
Fundamento
La lectura de estás reacciones se hace por
comparación con un control de crecimiento.
Metodología
Interpretación
La lectura se realiza entre 48 horas de incubación, o de 72 horas (si los ensayos, en particular, la
glucosa no resultan muy claros). Observar el crecimiento de las levaduras con respecto al
crecimiento de la cúpula cero que es el control negativo. Una cúpula con mayor turbidez que la
del control negativo nos indica una reacción positiva que se debe anotar como positiva en la
hoja de resultados. Se suman los números de cada tripleta y se obtiene una cifra de 7 números
que permite la identificación de la especie.