SISTEMAS COMERCIALES

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BIBLIOGRAFÍA: https://www.microplanet-psl.com/es/noticias/item/74-enteropluritest-identificacion-enterobacterias http://www.analisisavanzados.com/modules/mod_tecdata/R8311006%20RapID%20ONE%20System%20OXOID.pdf http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/API20E_18841.pdf http://www.guia.reviberoammicol.com/Capitulo11.pdf https://www.inciensa.sa.cr/inciensa/centros_referencia/cursos_cnrb/taller%20regional/diagnostico%20y%20psa%20de%20candida/lab%20protocols/API.pdf
Tiffany Shanti
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SISTEMAS COMERCIALES
  1. ENTEROTUBE
    1. Principio
      1. Este método microbiológico permite identificar enterobacterias y otras bacterias gramnegativas, procedentes de muestras clínicas o de cualquier otro origen.
      2. Metodología
        1. 1. Coger un tubo EnteroPluri®-Test y anotar en él: nombre de identificación de la muestra a identificar, la fecha de realización del test y otras informaciones que considere necesarias.
          1. 11. Desenroscar ambos tapones (rojo y azul) del EnteroPluri®-Test.
            1. 111. Con el extremo de la aguja correspondiente recoja una colonia bien aislada del medio de cultvo.
              1. IV. Inocular el EnteroPluri®-Test, estirando la aguja por el extremo opuesto, girando a la vez la aguja de inoculación a través de los pocillos del panel para una perfecta inoculación. Reinsertar nuevamente la aguja hasta la muesca de fractura que aparece grabada y con un movimiento de torsión romper la aguja de inoculación por la muesca.
                1. V. La parte de la aguja que queda dentro del panel mantiene las condiciones anaerobias necesarias para las reacciones de la glucosa/del gas, de la lisina y de la ornitina de los diferentes sectores.
                  1. VI. Antes de desecharla, utilizar el trozo de aguja cortada de la aguja para perforar la película plástica en los sectores adonitol, lactosa, arabinosa, sorbitol, VP, Dulcitol/PA, urea y citrato, para crear las condiciones aeróbicas.
                    1. VII. Cerrar otra vez ambos extremos con los tapones e incubar el EnteroPluri®-Test a 36°C ± 1°C durante 18-24 horas, colocándolo verticalmente en una gradilla o bien en una superficie plana.
                      1. VIII. Anotar los resultados obtenidos en la hoja de datos, para la obtención del código numérico de interpretación, excepto la prueba del Indol y de Voges-Proskauer.
                        1. IX. Inyectar con una jeringuilla 3 ó 4 gotas del reactivo de Kovac en el sector H2S/Indol. Igualmente inyectar 3 gotas del alfa-naftol y 2 gotas del hidróxido de potasio en el sector VP.
                          1. X. Completar el código de 5 dígitos siguiendo las instrucciones e identificar finalmente la bacteria usando el Libro de Códigos.
              2. Interpretación
                1. Una vez finalizada la incubación, se observa el cambio de color de los medios de los distintos sectores. A continuación, se pueden interpretar los resultados con la ayuda de la siguiente tabla:
              3. RAPID ONE SYSTEM
                1. Principio
                  1. Es un micrométodo cualitativo que utiliza sustratos convencionales y cromogénicos para la identificación de microorganismos
                    1. Metodología
                      1. Interpretación
                    2. API 20E
                      1. Fundamento
                        1. Establecer la metodología en la identificación de enterobacterias por medio de pruebas bioquímicas estandarizadas y miniaturizadas.
                        2. Metodología
                          1. Interpretación
                            1. Pasado el tiempo de incubación consultar el Cuadro 1, para la adición de reactivos en los tubos respectivos y para la interpretación de resultados. Consultar el Cuadro 2 para obtener un número de identificación característico para cada especie. Consultar la Tabla de identificación del sistema API 20E (API 20E Analytical Profile Index, Bio-Mériux 2019) o el software APILAB (Bio-mériux), para determinar el género y la especie de la cepa aislada (En caso de no contar con la bibliografía mencionada, se podrá consultar el Bergey’s Manual para la identificación de la cepa aislada con base en los resultados de las pruebas bioquímicas).
                          2. SISTEMA UNI-YEAST-TEK (REMEL)
                            1. Fundamento
                              1. Está constituído por una placa plástica con múltiples compartimientos que contiene un medio con agar para la asimilación diferencial de siete hidratos de carbonos.
                              2. Metodología
                                1. 1. A partir de un cultivo de 24-48 h en medios habituales, realizar una suspensión en agua destilada estéril equivalente a 4 McFarland. Inocular cada uno de los compartimentos con una gota de esta suspensión.
                                  1. 11. El compartimiento con agar harina de maíz se siembra, con una pequeña porción de la colonia, haciendo dos o tres surcos paralelos con aguja de inoculación. Seguidamente, se coloca un cubreobjeto flameado sobre el área inoculada.
                                    1. 111. Incubar a 30-35 °C durante 2-7 días
                                2. Interpretación
                                  1. La observación de cambio de color del azul al amarillo indica asimilación de los hidratos de carbono.
                                    1. El medio de nitrato se interpreta como reducción cuando el color azul original vira al color verde o verde azulado.
                                      1. La detección de hifas, blastosporas y clamidosporas en el agar harina de maíz se detecta mediante visualización con objetivo de 40X.
                                    2. API-20C AUX (BIOMERIEUX)
                                      1. Fundamento
                                        1. La lectura de estás reacciones se hace por comparación con un control de crecimiento.
                                          1. Metodología
                                            1. Interpretación
                                              1. La lectura se realiza entre 48 horas de incubación, o de 72 horas (si los ensayos, en particular, la glucosa no resultan muy claros). Observar el crecimiento de las levaduras con respecto al crecimiento de la cúpula cero que es el control negativo. Una cúpula con mayor turbidez que la del control negativo nos indica una reacción positiva que se debe anotar como positiva en la hoja de resultados. Se suman los números de cada tripleta y se obtiene una cifra de 7 números que permite la identificación de la especie.
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