Testes bioquímicos

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• Os testes bioquímicos avaliam a presença ou ausência de enzimas envolvidas em processos metabólicos ou pela geração de um produto resultado do consumo de algum substrato.

1. Vias metabólicas

   Annotations:

   • Utilizam-se de compostos ogânicos e inorgânicos oriundos da natureza para produzir energia para realizar trabalho. Metabolismo é todas as reações químicas que ocorrem em um organismo para geração de energia obtida através da quebra de moléculas doadoras de energia, podendo ser catabólicas e anabólicas.
   1. Glicólise

      Annotations:

      • Dividida em 3 etapas:  1. Reações preparatórias: ocorre a fosforilação do substrato com consumo de ATP. 2. Oxidação: ocorre a geração de ATP e piruvato 3 Síntese dos produtos de fermentação: processos fermentativos
      • Saldo de 2 moléculas de ATP e 2 moléculas de NADH para cada molécula de glicose.
      1. Fermentação ácido-homolática

         Annotations:

         • O ácido pirúvico é convertido em ácido lático pela utilização dos elétrons fornecidos pelo NADH. É um processo que não forma gás.
      2. Fermentação alcoólica

         Annotations:

         • O ác. pirúvico é convertido em CO2 e acetaldeído (que é reduzido em álcool etílico), também usando molécula de NADH.
   2. Via das pentoses

      Annotations:

      • Uma via alternativa,proporcionando a quebra de açúcares de 6 e 5 carbonos, gerando pentoses que podem usadas, posteriormente, na produção de ácidos nucléicos, síntese de alguns aminoácidos, etc.
   3. Ciclo de Krebs

      Annotations:

      • Em presença de oxigênio, o piruvato pode ser oxidado no Ciclo do ácido cítrico. Inicia-se com a entrada da Acetil-CoA no ciclo, sendo oxidado, gerando NADH, FADH2 e GTP.
   4. Cadeia transportadora de elétrons

      Annotations:

      • Os elétrons carregados pelas coenzimas NADH e FADH2 entram na CTE e vão gradativamente liberando energia ao passarem de um nível maior para um nível menor. Essa energia liberada é usada para a síntese de ATP.
      • A respiração aeróbica gera um saldo de 38 moléculas de ATP. O processo fermentativa gera um saldo de 2 moléculas ATP.
2. Fermentação de carboidratos

   Annotations:

   • É utilizado para avaliar a habilidade de um microrganismo em fermentar vários carboidratos.
   • É utilizado um meio líquido ou caldo vermelho de fenol e a presença de um carboidrato fermentável, com um tubo de Durham.
   • A bactéria que fermenta o carboidrato produz ácido (e/ou gás). Os ácidos promovem uma diminuição do pH do meio, mudando a cor do indicador. Se os gases forem produzidos, bolhas se encontrarão no tubo de Durham. Se a bactéria não fermenta o carboidrato, o meio permanecerá vermelho. Isso ocorre porque, os aminoácidos, fornecido pela peptona, pode ser degradados por desaminação, gerando NH3 no meio que aumenta o pH, tornando-o alcalino.
3. VM e VP

   Annotations:

   • Vemelho de Metila: Visa identificar se a bactéria é capaz de produzir ácidos estáveis como produtos finais da fermentação.
   • Voges-Proskauer: identifica organismos capazes de produzir acetoína a partir da degradação da glicose através da via butilenoglicólica.