PCR-REACCIÓN DE LA CADENA DE POLIMERASA

Paola Caviedes
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Mind Map on PCR-REACCIÓN DE LA CADENA DE POLIMERASA, created by Paola Caviedes on 04/13/2018.

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PCR-REACCIÓN DE LA CADENA DE POLIMERASA
  1. Qué es?
    1. Es una técnica para hacer miles de copias de una determinada región de ADN
    2. Ingredientes de la PCR
      1. Enzima polimerasa
        1. Taq polimerasa, por la bacteria tolerante al calor de la que se aisló (Thermus aquaticus). La Taq polimerasa es ideal para la PCR gracias a esta estabilidad térmica
        2. Pimers o Cebadores
          1. son
            1. Una corta secuencia de nucleótidos que proporciona un punto de partida para la síntesis de ADN.
          2. ADN molde
            1. A partir del cual se quiere amplificar un fragmento o secuencia determinada. Normalmente es el ADN genómico
            2. Nucleótidos
              1. Bloques básicos del ADN
              2. cofactores
                1. MgCl2: lo necesita la Taq para actuar
                2. Tampón de la Taq
                  1. En este tampón se encuentran todos los reactivos necesarios para que la Taq actúe eficientemente, y regula el pH de la reacción.
                  2. Agua destilada y estéril:
                    1. En ella se van a diluir todos estos reactivos que componen la mezcla de reacción.
                  3. Los pasos de la PCR
                    1. 1. Desnaturalización (96°C): la reacción se calienta bastante para separar, o desnaturalizar, las cadenas de ADN. Esto proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente paso.
                      1. 2. Templado (55°C-65°C): la reacción se enfría para que los cebadores puedan unirse a sus secuencias complementarias en el molde de ADN de cadena sencilla.
                        1. 3. Extensión (72°C): la temperatura de la reacción se eleva para que la Taq polimerasa extienda los cebadores y sintetice así nuevas cadenas de ADN.
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