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Description
Mind Map by gaby tituaña, updated more than 1 year ago
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Created by gaby tituaña
about 5 years ago
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Decalcificación de tejido óseo.
- Corte de hueso
- Cuando hay minerales en los tejidos, como
por ejemplo en el hueso, dentina, o en
procesos patológicos calcificantes en tejidos
blandos, es muy difícil obtener buenas
secciones finas, bien sea de material incluido
en parafina o de material en congelación. En
estos casos el proceso histológico debe
incluir un paso en el que se eliminan tales
minerales denominado generalmente como
descalcificación
- Cuando hay minerales en los tejidos, como
por ejemplo en el hueso, dentina, o en
procesos patológicos calcificantes en tejidos
blandos, es muy difícil obtener buenas
secciones finas, bien sea de material incluido
en parafina o de material en congelación. En
estos casos el proceso histológico debe
incluir un paso en el que se eliminan tales
minerales denominado generalmente como
descalcificación
- Decalcificadores: Tipos, Métodos, Ventajas y desventajas
- Basados en ácidos
- Hay dos grupos de ácidos: los fuertes (inorgánicos) y los débiles (orgánicos). Los ácidos fuertes suelen
ser rápidos pero son muy agresivos por lo que el tiempo debe ser el mínimo posible, ya que si es
excesivo producen daños en los núcleos y maceran el tejido. Los ácidos débiles son más lentos pero
preservan mejor al tejido. Los ácidos fuertes más usados son el ácido clorhídrico, el ácido nítrico,
mientras que el débil es el ácido fórmico. Cuanto más agresivos son los ácidos más se deterioran las
enzimas y los antígenos para realizar pruebas enzimáticas o inmunocitoquímicas. Los ácidos también
deterioran los ARN citosólicos por lo que las hibridaciones in situ se ven comprometidas El ácido
clorhídrico y el ácido nítrico se suelen usar al 5-10 % en agua. Descalcifican rápidamente y su acción
no debería prolongarse más de 24-48 horas. No se recomiendan para inmunocitoquímica ni ensayos
enzimáticos. Se emplean para muestras pequeñas y diagnósticos rápidos. El ácido fórmico es el ácido
- Agentes quelantes
- Los agentes quelantes son aquellas sustancias orgánicas que pueden unirse covalentemente a iones
metálicos formándose un compuesto soluble llamado quelato de metal. El EDTA (ácido
etilendiaminotetraacético) secuestra iones de calcio, presentes en los cristales de hidroxiapatita del
hueso, por lo que progresivamente irá disminuyendo el tamaño del cristal. Se usa entre el 10 y el 14 %
en soluciones acuosas o tamponadas. Es un proceso lento, la descalcificación se puede extender
durante semanas, pero aporta una buena preservación de la estructura tisular. Se puede acelerar el
proceso aumentando el pH de la solución (superior a 7), pero esto puede afectar a la calidad del
tejido. El EDTA une calcio superficial del cristal y por tanto lo que se produce es una reducción
progresiva del tamaño de los cristales. Es un proceso muy lento (6 a 8 semanas) pero que no daña el
tejido. Así, cuando el tiempo no es importante es el método recomendado. La solución deberia
cambiarse cada 3 a 5 días.
- Los agentes quelantes son aquellas sustancias orgánicas que pueden unirse covalentemente a iones
metálicos formándose un compuesto soluble llamado quelato de metal. El EDTA (ácido
etilendiaminotetraacético) secuestra iones de calcio, presentes en los cristales de hidroxiapatita del
hueso, por lo que progresivamente irá disminuyendo el tamaño del cristal. Se usa entre el 10 y el 14 %
en soluciones acuosas o tamponadas. Es un proceso lento, la descalcificación se puede extender
durante semanas, pero aporta una buena preservación de la estructura tisular. Se puede acelerar el
proceso aumentando el pH de la solución (superior a 7), pero esto puede afectar a la calidad del
tejido. El EDTA une calcio superficial del cristal y por tanto lo que se produce es una reducción
progresiva del tamaño de los cristales. Es un proceso muy lento (6 a 8 semanas) pero que no daña el
tejido. Así, cuando el tiempo no es importante es el método recomendado. La solución deberia
cambiarse cada 3 a 5 días.
- Hay dos grupos de ácidos: los fuertes (inorgánicos) y los débiles (orgánicos). Los ácidos fuertes suelen
ser rápidos pero son muy agresivos por lo que el tiempo debe ser el mínimo posible, ya que si es
excesivo producen daños en los núcleos y maceran el tejido. Los ácidos débiles son más lentos pero
preservan mejor al tejido. Los ácidos fuertes más usados son el ácido clorhídrico, el ácido nítrico,
mientras que el débil es el ácido fórmico. Cuanto más agresivos son los ácidos más se deterioran las
enzimas y los antígenos para realizar pruebas enzimáticas o inmunocitoquímicas. Los ácidos también
deterioran los ARN citosólicos por lo que las hibridaciones in situ se ven comprometidas El ácido
clorhídrico y el ácido nítrico se suelen usar al 5-10 % en agua. Descalcifican rápidamente y su acción
no debería prolongarse más de 24-48 horas. No se recomiendan para inmunocitoquímica ni ensayos
enzimáticos. Se emplean para muestras pequeñas y diagnósticos rápidos. El ácido fórmico es el ácido
- Basados en ácidos
- Inmunohistoquímica: Diferentes pruebas especificas
- La inmunocitoquímica es una técnica para la
localización de moléculas en los tejidos mediante
el empleo de anticuerpos. Es una técnica que
gracias a la oferta comercial de anticuerpos y a la
estandarización de su protocolo se ha convertido
en un método sencillo, rápido y muy potente. Se
basa en la gran especificidad y alta afinidad que
tienen los anticuerpos para reconocer a moléculas
y unirse a ellas. Además, la conjugación o
combinación de los anticuerpos con enzimas o
con sustancias fluorescentes permite detectar
cantidades ínfimas de moléculas presentes en el
tejido.
- La inmunocitoquímica es una técnica para la
localización de moléculas en los tejidos mediante
el empleo de anticuerpos. Es una técnica que
gracias a la oferta comercial de anticuerpos y a la
estandarización de su protocolo se ha convertido
en un método sencillo, rápido y muy potente. Se
basa en la gran especificidad y alta afinidad que
tienen los anticuerpos para reconocer a moléculas
y unirse a ellas. Además, la conjugación o
combinación de los anticuerpos con enzimas o
con sustancias fluorescentes permite detectar
cantidades ínfimas de moléculas presentes en el
tejido.
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