Natural progression of atherosclerosis from pathologic intimal thickening to late fibroatheroma in human coronary arteries: A pathology study

Sheila Cristina
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Atherosclerosis 241 (2015), 772-782 Otsuka, F. ; Kramer M.C.A.; et al

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Natural progression of atherosclerosis from pathologic intimal thickening to late fibroatheroma in human coronary arteries: A pathology study
  1. Introdução
    1. - Placas são responsáveis pela maioria dos eventos agudos de isquemia cardiovascular
      1. - De acordo com a American Heart Association, a primeira característica da aterosclerose progressiva é o espessamento patológico da íntima
        1. - O espessamento patológico da íntima é caracterizado pelo acúmulo lipídico extracelular
          1. de lipídios ricos em proteoglicanos e hialuronano.
        2. - Inflamação - exerce papel fundamental na progressão e desestabilização de lesões ateroscleróticas
          1. O que pode caracterizar a progressão do espessamento patológico da íntima para fibro ateromas é a infiltração de macrófagos
            1. Os processos envolvidos são pouco compreendidos
              1. Apoptose macrofágica tem sido relatado como processo integral de progressão da placa
                1. A formação do núcleo necrótico no fibroateroma tb está relacionado com o aumento da apoptose macrofágica
            2. Moléculas de Matriz Extracelular - compõe a massa da placa, regulam o acúmulo de lipídios e o tráfico de células inflamatórias para o INTERIOR da placa
              1. Muitos proteoglicanos e hialuronano diferentes, que são componentes não fibrilares do ECM, foram identificadas em placas ateroscleróticas e são sintetizadas pelas células do músculo liso vascular (SMCs) e influenciada por fatores de crescimento
                1. Proteoglicanos
                  1. É bem estabelecido que os dois principais tipos celulares dos vasos sangüíneos, as células endoteliais e as musculares lisas, sintetizam os proteoglicanos
                    1. Os proteoglicanos arteriais são reconhecidamente fatores importantes no processo da aterosclerose tanto pela habilidade em seqüestrarem lipídeos para dentro da parede arterial, quanto pelo envolvimento nos processos de adesão, migração e proliferação celular
              2. Métodos
                1. 67 pacientes
                  1. Morte súbita
                    1. 41 causas coronárias
                      1. 26 causas não coronárias
                    2. Lesões artérias coronárias
                      1. Classificação
                        1. Placas coronárias precoces foram classificados usando a classificação AHA modificada para incluir o espessamento adaptativado da camada íntima (AIT), camadas de gordura, espessamento patológico intimal (PIT), e fibroatheromas
                          1. AIT espessamento adaptativo da camada intima, consiste principalmente de SMC e proteoglicano da matriz, com pouca ou nenhuma infiltração de células inflamatórias.
                            1. Camadas de gordura representam lesões principalmente compostas por células espumosas derivadas de macrófago e em menor grau de células de músculo liso contendo lipídios
                              1. PIT - espessamento patológico intimal é caracterizada pela presença na luz do vaso de SMCs intercalados, dentro da matriz extracelular. Também as áreas de acumulo de lípidio extracelular com ausência de SMC (pool de lípido) na proximidade da camada média
                                1. . Que foram divididos em dois grupos com base na presença ou ausência de infiltração de macrófagos
                                  1. PIT sem macrófagos
                                    1. PIT com macrófagos
                                  2. Fibroateromas foram caracterizados por uma capa fibrosa densa que recobre um núcleo necrótico.
                                    1. Esta lesão foi dividida em duas fases diferentes; precoce e tardia.
                                      1. Fibroateroma precoce foi definida como uma lesão que consiste de infiltração de macrófagos na área lipídica formadora de necrose, com perda de proteoglicanos, como avaliado pela pentachrome coloração de Movat, e alguns cristais de colesterol livres.
                                        1. Fibroateroma final consiste de núcleo necrótico com coleções discretas de restos celulares, aumento de cristais de colesterol livre e depleção completa de matriz extracelular (proteoglicanos e colágeno).
                                2. Imuno-histoquímica
                                  1. anti-CD68 - Macrófagos
                                    1. anti-CD 45RO - linfócitos T
                                      1. anti-CD31/34 - células endoteliais
                                        1. Proteoglicanos
                                          1. Afinidade histoquímica
                                            1. mouse IgG - versican
                                              1. anti-sera IgG (LF-51) - biglycan
                                                1. anti-sera IgG (LF-136) - decorin
                                                2. Anticorpo específico
                                                  1. VC-E para a região poli-E versicano humano
                                                3. Coloração de von Kossa e alizarin - primeiramente mineralização depois calcificação
                                                  1. Oil red O - corante lipídico
                                                  2. Preparação histológica
                                                    1. Lâminas
                                                      1. Cortes histológicos - parafinados
                                                        1. Hematoxilina-eosina
                                                          1. Movat pentacromo
                                                            1. von Kossa e alizarin
                                                            2. Cortes congelados
                                                              1. Oil red O
                                                          2. Apoptose
                                                            1. Núcleos apoptóticos foram identificadas por marcação in situ final (ISEL) coloração fragmentação de DNA. A co-localização de núcleos apoptóticos em macrófagos foram avaliadas por ISEL combinadas com imunocoloração utilizando um anticorpo anti-CD68. As secções de tecido foram inicialmente coradas para a fragmentação de ADN de substituição, seguido de imunocoloração de macrófagos.
                                                            2. Análises morfométricas
                                                              1. software de imagem IPLabs
                                                                1. Movat pentachrome
                                                                2. Planimetria quantitativa
                                                                  1. área interna da lâmina elástica, lumen e núcleo necrótico
                                                                    1. área da placa foi definido como área da lâmina interna menos lumen
                                                                      1. percentagem de estenose foi definida como área da placa dividido pela área da lâmina elástica
                                                                  2. Análises estatísticas
                                                                    1. distribuição normal das variáveis - média e desvio padrão
                                                                      1. distribuição não-normal das variáveis - mediana e 25º e 75º percentis
                                                                        1. variáveis contínuas com distribuição normal - one-way ANOVA - pós teste Turkey para diferença entre as médias
                                                                          1. variáveis contínuas com distribuição não-normal - Wilcoxon Kruskal-Wallis
                                                                            1. JMP5 - utilizada para as análises estatísticas
                                                                              1. valores de p<0.05 foram considerados estatisticamente significantes
                                                                            Show full summary Hide full summary

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