PRÁCTICA 5: INFECCIONES DE VÍAS RESPIRATORIAS

Ketzalzin  Meza Aupart
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Práctica 5 enfermedades infecciosas del vías respiratorias (Estreptococo Pyogenes)

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PRÁCTICA 5: INFECCIONES DE VÍAS RESPIRATORIAS
  1. OBJETIVOS GENERALES : Establecer un marco de referencia para el estudio de las infecciones bacterianas de vías respiratorias. Identificar los principales agentes etiológicos que producen infecciones de vías respiratorias. Revisar los recursos de laboratorio para el diagnóstico de las infecciones bacterianas de vías respiratorias.
    1. ANTECEDENTES: Entre los microorganismos involucrados en procesos infecciosos de vías respiratorias, se encuentra; Streptococcus pyogenes también llamado Estreptococo beta hemolítico del grupo A de Lancefield. Así como estreptococos del grupo C, D, Streptococcus pneumoniae, Arcanobacterium haemolyticum, Staphylococcus aureus, Neisseria gonorrhoeae, Corynebacterium diphtheriae, Haemophilus influenzae tipo b, Bordetella pertussis, Borrelia vincenti, Fusobacterium sp y Mycobacterium tuberculosis
      1. Entre los virus tenemos una alta participación de Adenovirus, Epstein-Barr, Coxsackie A, Herpes simple 1 y 2, Virus de la Influenza A y B, Parainfluenza, Coronavirus y Citomegalovirus. Las muestras que se emplean en infecciones de vías respiratorias incluyen, exudado faríngeo, exudado nasal, exudado nasofaríngeo, lavado nasal, aspirado sinusal y esputo entre otras.
        1. En el caso del exudado faríngeo, su indicación se encuentra dada con el fin de realizar la detección del microorganismo involucrado en el proceso infeccioso de la región. Sin embargo, debemos considerar que siendo una región altamente colonizada por microorganismos que forman parte de la flora habitual, la realización de la toma de muestras debe ser la adecuada para la recuperación y cultivo de los microorganismos involucrados en el proceso infeccioso.
      2. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA : El profesor de laboratorio conjuntamente con los alumnos revisará un caso clínico de infección de vías respiratorias e identificarán: a) Datos relevantes del caso. b) Posibles diagnósticos clínicos. c) Productos biológicos empleados para el diagnóstico de laboratorio.
        1. MATERIAL 1.Placa de gelosa sangre 2. Placa de gelosa sal manitol 3. PlacaBiggy 4. Hisopos estériles 5.Abatelenguas estériles 6. Asas bacteriológicas 7. Mecheros . 8. Equipo de Tinción de Gram 9.Papel seda 10. Caso clínico
          1. .1. Para realizar el aislamiento de las bacterias del exudado faríngeo, se marcan las zonas de inoculación en cada medio de cultivo
            1. MÉTODO
              1. 2. Toma de muestra: se le pide al paciente que abra bien la boca, se hace descender suavemente la lengua con el abatelenguas y se introduce un hisopo estéril hacia la faringe posterior. Pasar suave y rápidamente el hisopo con movimientos hacia arriba y abajo por detrás de la úvula y entre los pilares tonsilares
                1. 3. Rotar el hisopo en la zona número uno de la placa de gelosa sangre y agar sal manitol. Además frotarlo en la superficie del medio de Biggy y finalmente hacer un frote e.n una laminilla
                  1. 4. Continuar con la distribución de la muestra empleando el asa bacteriológica previamente esterilizada con el fin de lograr el aislamiento deseado. 5. Incubar los cultivos a 37° C. durante 24 a 48 horas
                    1. 6. Fijar y teñir el frote con el método de Gram 7. Observar al microscopio
              2. Sesión II: (Identificación macroscópica y microscópica) 1. Cultivos demostrativos 2. Cultivos de la práctica anterior 3. Equipo de tinción de Gram 4. Laminillas 5. Cubreobjetos 6. Asas bacteriológicas 7. Mecheros 8. Microscopio 9. Aceite de inmersión 10. Papel para la limpieza del microscopio
                1. PRUEBAS BIOQUÍMICAS DEMOSTRATIVAS 1.Determinación de hemólisis 2. Prueba de CAMP 3. Bacitracina 4. Optoquina 5. Realizar determinación serológica en caso de probable Streptococcus pyogenes
                  1. INTERPRETACIÓN MACROSCÓPICA Y MICROSCÓPICA. Gelosa sangre: Observar la morfología colonial, determinar el tipo de hemólisis (Alfa, Beta o Gamma) 2. Agar sal manitol: Medio que permite observar la capacidad de fermentación del manitol por parte de Staphylococcus aureus. El indicador hará un vire en el medio de cultivo hacia el color amarillo en caso positivo. Si no hay cambio en la coloración lo consideramos negativo. 3. Medio Biggy: Las colonias que se observen de color café obscuro o negro, corresponden a Candida. 4. El halo de inhibición de bacitracina será positivo para estreptococo del grupo A. 5. Prueba de CAMP Permite diferenciar estreptococo beta hemolítico. Es negativa para Streptococcus pyogenes y positiva en caso de Streptococcus agalactiae
                    1. Es importante su realización con el fin de orientar el tratamiento y pronóstico de infecciones producidas por Streptococcus pyogenes 1.Colocar una gota de una suspensión de colonias aisladas de una placa. 2. Añadir igual cantidad de antisuero SBGA. 3. Mezclar y leer a los dos minutos contra fondo obscuro. 4. En otro pozo de la placa de aglutinación realizar la prueba de control negativo. 5. Comparar resultados.
                      1. INTERPRETACIÓN La presencia de grumos indica SBGA. Esta prueba puede hacerse directamente del exudado faríngeo, lo que permite realizar el diagnóstico rápido. Sin embargo, los resultados negativos deben ser comprobados por el cultivo
                        1. CASO CLÍNICO (Relación del caso clínico con la práctica)
                          1. FICHA DE DATOS Nombre: Mario Martínez Tapia Edad: 20 años Escolaridad: 2do año de licenciatura Lugar de origen: México D.F, Coyoacán, México D.F Ocupación: estudiante
                            1. Paciente masculino de 20 años acude al servicio de admisión, Continua en el hospital centro médico siglo XXI, por presentar desde hace 2 semanas fiebre de 39°c, acompañado de anorexia, astenia y adinamÍa.
                              1. Padecimiento actual: Inicio su padecimiento hace 2 semanas con presencia de fiebre de 39° acompañado de anorexia, astenia y adinamia, con presencia de “ardor de garganta”, refiere la aparición de “unas bolitas” localizadas en la región preauricular no dolorosas. Comenta que ha presentado en 2 ocasiones vomito de contenido gástrico.
                                1. Exploración física: FC: 110 lpm FR: 22 rpm T: 39°c TA: 120/80 mmHG Peso: 70 kg Talla: 1.72 MC: 23.7
                                  1. Masculino de 20 años de edad aparente a la cranologica, en malas condiciones generales, consiente, ubicado en tiempo, lugar y persona.Cavidad oral y faringe: eritema del paladar blando, úvula y faringe posterior. Torax y mov. De amplexión y amplexación simétricos. Murmullo vesicular, presente. Adecuada transmición de la voz. Claro pulmonar a la percusión, no se integra Sx Pleuropulmonar, ruidos cardiacos rítmicos de buen tono con adecuada intensidad y frecuencia.
                                    1. DIAGNÓSTICO PRESUNTIVO: Faringoamigdalitis Estreptocócica
                                      1. POR STREPTOCOCUS PYOGENES
                                        1. EXUDADO FARÍNGEO - CULTIVO EN AGAR SANGRE- MUESTRA B HEMÓLISIS
                                          1. TRATAMIENTO: SE REALIZA UN ANTIBIOGRÁMA PARA ELEGIR EL ANTIMICROBIANO (ANTIBIÓTICO) MÁS EFICÁZ
                                          2. COCOS - BACTERIAS GRAM +
                                            1. B HEMOLÍTICOS O DEL GRUPO A
                                            2. serología ( indentificación de serotipos ): S.pyogenes del Grupo A
                              2. CONCLUSIONES: En el cultivo obtenido por el exudado faríngeo realizado al paciente nos dio muestras muy diferentes en los tres cultivos que teníamos (agar sangre, sal manitol y biggy). Con tan sólo un período de incubación de dos días en el agar sangre se obtuvieron colonias muy marcadas pero de la cual no se distinguió una β-hemolisis característica del estreptococos pyogenes. En el medio de sal manitol se observó unas pequeñas colonias, acumulándose éstas en tan sólo un lugar específico del agar. A diferencia de estos dos medios, en el agar biggy no se observó el crecimiento de alguna colonia.
                                1. De los dos primeros medios se tomaron muestras a las que se les realizaron la tinción de gramm. En ambas se lograron observar colonias de cocos gramm positivos agrupados en cadenas en forma de collar de perlas. Con todo éste procedimiento se observó una población de bacterias características de las vías aéreas superiores, el cual todas las personas poseen y no es característica de algún proceso patógeno o de algo con relevancia clínica.
                                2. PRUEBA DE LA BACITRACINA PARA S.PYOGENES
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