Tec. inmunoquimicas y de biologia molecular

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Tec. inmunoquimicas y de biologia molecular
1 Tecnicas de inmunoanalisis
1.1 Se basan en la deteccion de un Ag. en un especimen biologico mediante la utilizacion de un Ac. frente a aquel
1.1.1 Reactividad cruzada y estabilidad de Ag.
1.1.2 Moleculas de deteccion
1.1.2.1 Requeridas para detectar la union entre Ag. y Ac.
1.1.2.1.1 Marcaje radiosotopico
1.1.2.1.1.1 Las moleculas se pueden marcar facilmente sin alterar sus caracteristicas de union al ligando
1.1.2.1.2 Marcaje con fluorescencia
1.1.2.1.2.1 Permite separar los tiempos de excitacion y emision
1.1.2.1.3 Marcaje con enzimas
1.1.2.1.3.1 Se emplean distintos tipos de sustratos que producen reacciones con dif. sensibilidades
1.1.2.1.3.1.1 Reacc. cromogenicas
1.1.2.1.3.1.2 Reacc. de fluorescencia
1.1.2.1.3.1.3 Reacc. de luminiscencia
1.1.2.1.4 Electroquimioluminiscencia
1.1.2.1.4.1 La molecula marcada producira luz tras oxidarse en la superficie de un electrodo
1.1.2.1.5 Microparticulas
1.1.2.1.5.1 Pueden unir a varios ligandos de forma que la reacc. Ag-Ac. forma agregados
1.1.3 Cuantificacion y sensibilidad analiticas
1.1.3.1 Facilia la estandarizacion de los metodos
1.1.4 Inmunoanalisis competitivo
1.1.5 Inmunoanalisis no competitivo de tipo sandwich
2 Tecnicas de biologia molecular
2.1 Aislamiento de los acidos nucleicos
2.1.1 Se han de conservar en condiciones especiales para evitar su degradacion
2.2 Analisis de longitud de fragmentos de restriccion del ADN
2.2.1 Permiten obtener patrones de fragmentos de digestion enzimatica de ADN que se pueden separar
2.3 Tecnicas de hibridacion
2.3.1 Detectan secuencias de ADN de tipo Southern
2.4 Reaccion en cadena de la polimerasa
2.4.1 ´Permite obtener copias rapido y en grandes cantidades, mas de un millon de veces, de una secuencia especifica de ADN
2.4.1.1 Modificaciones
2.4.1.1.1 PCR con transcriptasa inversa
2.4.1.1.2 PCR cuantitativa
2.5 Secunuenciacion
2.5.1 Se utiliza en
2.5.1.1 -Tipificacion del HLA -Diagnostico de enf. causadas por mutaciones puntuales, etc.
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