Técnicas de Biologia Molecular

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Mind Map on Técnicas de Biologia Molecular, created by carosolisr on 05/13/2014.

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Técnicas de Biologia Molecular
1 Lisis: Romper la membrana celular con un agente caotrópico para liberar el material genetico
1.1
1.2
2 Precipitación: Etanol + sal (isopropanol) para precipitar los ácidos nucleicos
2.1
2.2
3 Purificación: quitar las sales con etanol y disolver el material genético con cloroformo o centrifugaciones
3.1 DNA
3.1.1 Electroforesis: separa según tamaño y carga a partir de electricidad; evalua la integridad.
3.1.1.1 Gel de Agarosa: soporte para que las moleculas migren en el, atravesandolo sin difundirse
3.1.1.2 Colorantes: específicos que se peguen a los ázucares de los ácidos nucleicos y que pueden atravesar el del de agarosa
3.1.1.2.1 Bromuro de etidio
3.1.1.2.2 Azul coomassie
3.1.1.3 Gel de poliacrilamida:para proteínas y pequeños fragmentos de DNA
3.1.2 PCR
3.1.2.1 Convencional: obtener un gran número de copias de un fragmento de DNA particular partiendo de un molde
3.1.2.2 Tiempo Real: variación del PCR que se usa para amplificar y al mismo tiempo cuantificar de forma absoluta el producto de DNA
3.1.3 Enzimas de restricción: se utiliza para analizar un fragmento específico de DNA y cortar al DNA en sitios exactos creando fragmentos de un tamaño definido
3.1.3.1 Mapas de restricción
3.1.3.1.1 Indican el lugar en el que espera el corte
3.1.3.2 Endonucleasas de restricción
3.1.3.2.1
3.1.4
3.2 RNA
3.2.1
3.2.2 Espectrofotometría: Mide la cantidad de energía que absorbe o transmite un sistema quimico en función de la longitud de onda
3.2.2.1 Se utiliza para determinar la cantidad de concentracón en una solución, para determinar la estructura molecular, identificar unidades estructurales especificas y determindar constantes de disociación
3.2.3 Retrotranscripción: proceso que implica la generación de una cadena de DNA a partir de un RNA