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Descrição
Mapa Mental por Jesús Edgardo Picón Díaz, atualizado more than 1 year ago
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Criado por Jesús Edgardo Picón Díaz
mais de 5 anos atrás
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Extracción del DNA
- Materiales y sustancias químicas
- 1.Puntas para microppipetas
- 2.Microppipetas
- 3.Gradillas y tubos
- 4.Tubos eppendorf
- 5.Buffer de lisis
- 6.Cloroformo propanol
- 7.Proteinasa K
- 8.Fenol cloroformó
- 8.Fenol cloroformó
- 7.Proteinasa K
- 6.Cloroformo propanol
- 5.Buffer de lisis
- 4.Tubos eppendorf
- 3.Gradillas y tubos
- 2.Microppipetas
- Equipos
- 1.Vortex
- 2. Centrifuga
- 3.Incubadora
- 3.Incubadora
- 2. Centrifuga
- Estamos listos para la extracción de DNA
- Procedimiento Clave
- 1.Colocar la muestra de líquido amniótico en un eppendorf y
centrifugar a 7000 RPM * 5 minutos
- 2. Se extrae del eppendorf, el sobrenadante
quedándonos el pellet
- 3.Colocar en el eppendort 700 microlitros de
solución de buffer de lisis
- 4. Mezclarlo en un Vortex y llevar a la incubadora por una hora a 56°
para que se active la proteinasa K
- 5. Después Colocar 500 microlitros de fenol cloroformo y Re
suspender por 10 minutos
- 6. Por lo tanto se lleva a centrifugar por 10 minutos a 13.000 RPM de esto resultan 3 fases se
retira el sobrenadante y en la fase del pedio están las proteínas
- 7. Se traspasa el sobrenadante a un nuevo tubo eppendorf y
realizamos lavados con fenol cloroformo hasta que no se observe la
interfaz de proteínas
- 8. Se precipita el ADN para esto se colocan 500 microlitros de
isopropanol y centrifugamos
- 9. Cuando lo retiramos de la centrifuga, observaremos el ADN al fondo, descartamos el sobrenadante y
añadimos agua milli-Q para su conservación
- 10. Se puede congelar a -20° o usarlo en otro procedimiento molecular
- 10. Se puede congelar a -20° o usarlo en otro procedimiento molecular
- 9. Cuando lo retiramos de la centrifuga, observaremos el ADN al fondo, descartamos el sobrenadante y
añadimos agua milli-Q para su conservación
- 8. Se precipita el ADN para esto se colocan 500 microlitros de
isopropanol y centrifugamos
- 7. Se traspasa el sobrenadante a un nuevo tubo eppendorf y
realizamos lavados con fenol cloroformo hasta que no se observe la
interfaz de proteínas
- 6. Por lo tanto se lleva a centrifugar por 10 minutos a 13.000 RPM de esto resultan 3 fases se
retira el sobrenadante y en la fase del pedio están las proteínas
- 5. Después Colocar 500 microlitros de fenol cloroformo y Re
suspender por 10 minutos
- 4. Mezclarlo en un Vortex y llevar a la incubadora por una hora a 56°
para que se active la proteinasa K
- 3.Colocar en el eppendort 700 microlitros de
solución de buffer de lisis
- 2. Se extrae del eppendorf, el sobrenadante
quedándonos el pellet
- 1.Colocar la muestra de líquido amniótico en un eppendorf y
centrifugar a 7000 RPM * 5 minutos
- Procedimiento Clave
- 1.Vortex
- 1.Puntas para microppipetas
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