Ohne Titel

PROCESSOS HISTOLÓGICOS

• Corantes que diferenciam os componentes ácidos e básicos das células;

• Corantes especializados que diferenciam os componentes fibrosos da matriz extra- celular;

• Sais metálicos que precipitam nos tecidos.

3. CLIVAGEM

Redução do tamanho da peça para facilitar a penetração da substância fixadora em menor tempo, evitando autólise

Por padrão, os fragmentos teciduais devem ter cerca de 3 mm de espessura

No caso de peças sólidas, o corte deverá acompanhar o maior diâmetro, e suas faces devem ser planas e paralelas

Órgãos ocos – estômago, intestino, bexiga – e de superfície – pele e mucosas – devem ser secionados de forma perpendicular à superfície, enquanto os de tecido muscular devem acompanhar paralelamente a orientação das fibras.

O corte deve ser feito em um só golpe e com o movimento se iniciando a partir do cabo para a ponta da lâmina para obter fragmentos planos e paralelos

É importante não pressionar o material fixado com pinça ou qualquer outro instrumental utilizado, para que não cause distorção da estrutura tecidual

4. PROCESSAMENTOS

Há desidratação através de banhos de álcool em concentrações crescentes, de etanol 70% a etanol 100%

Após a desidratação, realiza-se a diafanização com a finalidade de substituir o etanol por uma substância intermediária que seja misturáveis tanto em etanol como na substância utilizada na etapa seguinte (inclusão) para enrijecer o material.

Essa substância intermediária normalmente é o xilol. Ao final desta etapa, os tecidos se tornam transparentes

A amostra é colocada em parafina a fim de torná-la rígida e, dessa forma, permitir o corte em lâminas finas no micrótomo

Ao ser imersa em parafina fundida e colocada em uma estufa a 58-60°C, o calor promove a evaporação do xilol e a ocupação dos espaços teciduais por parafina

1.OBTENÇÃO DO MATERIAL

Coleta de material: As partes são retiradas com bisturi.

Obtenção de uma camada fina.

2.FIXAÇÃO DO MATERIAL

Procedimentos físicos/químicos para imobilizar a substancia nas células/tecidos.

Os agentes mais utilizados para esses procedimentos são o formol tamponado e o líquido de Bouin.

Retardam os efeitos post mortem, mantendo sua arquitetura normal.

5. INCLUSÃO

6. MICRONOTOMIA

Utilização de um micrótomo para obter cortes sucessivos, delgados e uniformes, a partir dos blocos de parafina.

Este aparelho é formado por uma lâmina (fixa ou descartável) de aço, afiada, e um braço ao qual se prende o bloco e que se desloca verticalmente.

A parafina envolve o exterior da peça e após endurecer, forma um bloco que será submetido à microtomia.

7. COLORAÇÃO

Visualização das estruturas.

Hematoxilina é uma base que cora, componentes ácidos das células na cor azul escura, como o DNA e RNA, tanto o núcleo, quanto algumas partes do citoplasma são os componentes ácidos.

Os corantes mais utilizados são: Hematoxilina e a Eosina (HE).

A Eosina é um ácido que cora as estruturas básicas da célula de rosa, estruturas encontradas no citoplasma e são chamadas de acidófilas.

8. SELAGEM

Procedimento que consiste em cobrir o tecido corado com uma lamínula de vidro.

Para fixar a lamínula na lâmina, podem ser utilizadas resinas naturais – Bálsamo do Canadá, ou meios sintéticos, como o Entella.

É imprescindível que as lamínulas sejam limpas (em solução alcoólica) até ficarem translúcidas antes de serem colocadas sobre o tecido, para evitar manchas e sombras ao microscópio.

9. OBSERVAÇÃO

É precis entender o que está sendo observado, desenhando, pensar que o orgão seccionado é tridimensional e é aconselhavél consulta de um atlas nesta etapa.