Análise de coliformes termotolerantes: procedimento

Análise coliformes termotolerantes

Com a pinça, colocar cuidadosamente na placa de Petri um cartão absorvente

Com pipeta esterilizada colocar 2,0 mL do meio de cultura no cartão absorvente e tampar a placa

Colocar a membrana filtrante no porta-filtro, com a pinça previamente flambada e fria

Agitar o frasco contendo a amostra, pelo menos 25 vezes

destampar e flambar a boca do frasco

verter, cuidadosamente, 100 mL de amostra no porta- -filtro, evitando que a água respingue sobre as bordas superiores

ligar a bomba de vácuo (seringa) e fazer a sucção

depois de filtrada a amostra, lavar 3 vezes as paredes do funil com água de diluição estéril com porções de 20 mL aplicando vácuo

após a lavagem e filtração, aliviar o vácuo e remover o funil do suporte

com a pinça flambada e fria, remover o filtro do suporte e colocá-lo dentro da placa de Petri, com o lado quadriculado para cima

tampar a placa de Petri e incubá-la invertida a 44,5 ± 0,2o C durante 24 ± 2 horas

encerrado o período de incubação, examinar o filtro fazendo a contagem das colônias

As colônias indicativas de coliformes termotolerantes aparecem de cor azul. As não coliformes aparecem com coloração clara ou rósea