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PRUEBA2
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- 1STAPHYLOCOCCUS Staphylococcus Aureus se destaca como un importante patógeno humano, produce infecciones tanto en la comunidad como a nivel hospitalario. También S. aureus es causa de una serie de infecciones producidas por toxinas como el síndrome del shock tóxico, la intoxicación alimentaria y el síndrome de piel escaldada. Staphylococcus Epidermidis es integrante de la flora normal de piel pero produce infecciones crecientes de piel y anexos, colonizando cuerpos extraños y también es causa de infecciones profundas en huéspedes inmunocomprometidos. Staphylococcus Saprophyticus es causa de infección urinaria baja en la mujer joven.TAXONOMIA
Los estafilococos son cocos Gram positivos, catalasa positivos y el diamino ácido en el
peptidoglicano es la L-lisina. El género Staphylococcus posee alrededor de 30 especies, de las
cuales destacaremos S. aureus, S. saprophyticus y S. epidermidis. - 2HÁBITAT Staphylococcus epidermidis es integrante de la flora normal de la superficie corporal donde sobrevive gracias a sus lipasas, mientras S .aureus se encuentra habitualmente a nivel de la nasofaringe y de zonas húmedas como pliegues inguinales y axilas. Algunas poblaciones pueden tener una tasa de colonización mayor como el personal de salud, los pacientes en hemodiálisis, diabéticos, adictos a drogas intravenosas, etc. A pesar que S. aureus posee numerosos factores de virulencia, puede convivir con el huésped humano formando parte de su flora normal sin causar ningún daño. Existen ocasiones en que este equilibrio se puede romper. Desde las narinas, los portadores pueden transferir bacterias a diferentes sectores de la piel, aunque habitualmente existe resistencia a la colonización de la piel intacta.MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA
Poseen tendencia a agruparse en
racimos. Tienen una forma esférica y un diámetro de alrededor de una micra. - 3MORFOLOGÍA MACROSCÓPICA En medios no selectivos, S. aureus presenta colonias de 1 a 3 mm de diámetro, lisas, levemente elevadas, de bordes enteros, levemente convexas y generalmente pigmentadas con un color que puede ir desde el crema al amarillo. Cuando crecen en agar sangre ovina se puede observar una zona de β-hemólisis alrededor de las colonias. S. epidermidis presenta colonias generalmente de menor tamaño y estas no presentan pigmentación.METABOLISMO
En cuanto a su forma de obtener energía es tanto a través de la fermentación como de la
respiración. En cuanto a los requerimientos de cultivo, son no exigentes desde el punto de
vista nutricional, creciendo en medios pobres y simples. En su relación con el oxigeno son
aerobios-anaerobios facultativos. - 4RESISTENCIAS A AGENTES FÍSICOS Y QUÍMICOS. Es muy resistente a las condiciones ambientales normales. Es capaz de sobrevivir hasta tres meses en un cultivo a temperatura ambiente. Muere expuesto a temperaturas mayores de 60 °C por una hora. En cuanto a los agentes químicos, es sensible a la mayoría de los desinfectantes y antisépticos, que lo matan en pocos minutos.STAPHYLOCOCCUS AUREUS
Desde el punto
de vista estructural S. aureus comparte las características de los gérmenes Gram positivos y
agrega algunas características distintivas.
La pared celular esta compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano. Se trata de un
polímero polisacárido compuesto por cadenas con uniones de tipo β (1-4) no ramificadas,
que contienen subunidades alternantes de ácido N-acetil murámico y N-acetil glucosamina.
El polímero polisacárido básico se halla también en muchos otros
microorganismos, mientras la cadena de unión cruzada de pentaglicina parece ser específica
de S. aureus. Tiene como función mantener la rigidez de la pared bacteriana y su resistencia
osmótica. - 5La pared celular de S. aureus posee una proteína característica llamada proteína A. Esta tiene la habilidad de unirse a la porción Fc de las moléculas de inmunoglobulina G (IgG), y por tanto funciona como factor de virulencia, ya que interfiere con la opsonización y la ingestión de los microorganismos por los PMN, activando el complemento y dando lugar a reacciones de hipersensibilidad inmediata y tardía. Esta proteína es inmunogénica y se hallan anticuerpos contra ella en sujetos con infecciones graves por S. aureus.DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD
Cualquier enfermedad infecciosa es el resultado de la interacción entre el microorganismo
causal y el huésped. Primero analizaremos los factores de patogenicidad con que cuenta S.
aureus. - 6Estos pueden ser divididos en tres grupos: -Componentes de la pared celular. -Enzimas: Catalasa, coagulasas, estafiloquinasas, hialuranidasa, lipasas, fosfolipasaC -Toxinas: S. aureus puede producir toxinas de acción general como las hemolíticas (α, β, γ y δ) y la leucocidina, y también toxinas especializadas como las exfoliatinas, toxina del shock tóxico y enterotoxinas. Las hemolisinas son importantes toxinas citolíticas sobre una variedad de células.
- 7FACTORES PREDISPONENTES DEL HUESPED Las infecciones causadas por S. aureus, no solo dependen de los factores de agresión que este microorganismo posee, sino también de alteraciones en los mecanismos de defensa del huésped. Dentro de los factores predisponentes del huésped tenemos: • Defectos de quimiotaxis leucocitaria congénitos o adquiridos (diabetes mellitus, artritis reumatoidea). • Defectos de opsonización por anticuerpos (hipogamaglobulinemia). • Defectos en la muerte intracelular luego de la fagocitosis (enfermedad granulomatosa crónica). • Heridas de piel (quemaduras, incisiones quirúrgicas, eczema). • Presencia de cuerpos extraños (suturas, vías venosas, prótesis). • Infecciones por otros agentes, particularmente virus (influenza). • Enfermedades crónicas como alcoholismo, falla renal crónica, enfermedades malignas, etc.PATOGENIA
S. aureus produce infecciones de dos maneras:
1. En forma directa, por invasión y posterior destrucción tisular local (proceso supurado),
o luego de haberse diseminado por vía sanguínea.
2. A través de efectos de toxinas.
La tabla 2 muestra los tipos de infección que produce S. aureus y la tabla 3 muestra la
secuencia de eventos asociados a infecciones serias causadas por S. aureus. - 8INFECCIONES POR INVASIÓN Este tipo de infecciones puede estar producido tanto por cepas de S. aureus residentes como no residentes. El primer paso de la infección es la adherencia y colonización de las células del huésped. Se describen tres tipos de adherencia; la adherencia a las células de la mucosa nasal mediada por los ácidos teicoicos y también es importante la adherencia a la mucina de la mucosa nasofaríngea. -La adherencia a piel traumatizada o pequeñas disrupciones de piel, así como también a objetos extraños y estructuras subendoteliales. Ésta adherencia envuelve muchas proteínas de la matriz extracelular como fibronectina, fibrinó- geno, elastina, colágeno y otras. -La adherencia de S. aureus a las células endoteliales durante los eventos de sepsis es un proceso complejo donde están involucradas la fibronectina, el fibrinógeno y la laminina.Una vez los microorganismos atravesaron la barrera cutaneomucosa, llegan al tejido
subcutáneo o submucoso y se diseminan rápidamente, formando abscesos. Esta es la lesión
típica producida por este microorganismo. Los mecanismos de la invasión son poco conocidos
pero a este nivel se desencadena la respuesta inflamatoria del huésped que contribuye a la
formación de los abscesos.
Sólo la mayor intensidad de los factores bacterianos junto al fracaso de los mecanismos
defensivos del huésped puede llevar a que las bacterias puedan llegar a la corriente sanguínea,
diseminarse y producir focos de infección a distancia llamados abscesos metastásicos. Los
eventos que llevan a la sepsis y muerte aún no son del todo conocidos. Aparentemente los
ácidos teicoicos y el peptidoglicano podrían actuar como la endotoxina de los bacilos Gram
negativos.
Además de infecciones de piel y partes blandas, S. aureus puede producir infecciones
invasivas como neumonía, osteomielitis, bursitis, artritis y otras. - 9INFECCIONES POR ACCIÓN DE TOXINAS Estas infecciones están causadas por la liberación al medio de sustancias tóxicas.
- 10—RESPUESTA DEL HUÉSPED
La integridad de la barrera cutánea y un sistema fagocítico intacto son los principales mecanismos
de defensa contra las infecciones estafilocócicas.
El reconocimiento de S. aureus por los fagocitos
está mediado por sus receptores para el fragmento Fc de la IgG, por sus receptores para la
subunidad C3b del complemento, y posiblemente por otros receptores del complemento.
Durante la infección estafilocócica se producen algunos anticuerpos contra distintos
antígenos de la pared celular, así como contra varias toxinas.
- 11CUADROS CLÍNICOS La lesión característica producida por S. aureus es el absceso, este se puede presentar a nivel de la piel como forúnculo. Esta lesión es blanda, eritematosa y caliente. A las 24-48 horas desarrolla una pústula central blanca. Dentro, el material purulento es cremoso, amarillento, y frecuentemente tiene un centro constituido generalmente por un folículo piloso que es el sitio donde la infección se inició.RESISTENCIA ANTIBIÓTICA
S. aureus puede poseer resistencia para diferentes antimicrobianos. En general los estafilococos
aislados de infecciones comunitarias, hasta hace poco tiempo, no poseían muchos genes de
resistencia salvo por la producción de penicilinasa.
En
cuanto a los aislamientos de origen nosocomial, un elevado porcentaje de los mismos tienen
varios determinantes de resistencia y fundamentalmente resistencia a meticilina, asociada a
resistencia a aminoglucósidos, macrólidos y quinolonas. - 12RESISTENCIA A β-LACTÁMICOS Existen variados mecanismos que median resistencia a β-lactámicos. La producción de β- lactamasa inactiva ciertos β-lactámicos por medio de la hidrólisis del anillo β-lactámico. Estas enzimas atacan a la penicilina G, ampicilinas, carboxipenicilinas y ureidopenicilinas. Más del 90% de los aislamientos de S. aureus produce este tipo de enzimas, también llamadas penicilinasas. Parte de la enzima que se produce es excretada al medio externo y parte permanece adherida a la membrana celular. Se han reconocido cuatro variantes de β-lactamasa llamadas A, B, C y D. En la mayoría de los aislamientos esta enzima es codificada por plásmidos, pero también se puede encontrar a nivel cromosómico como parte de un elemento transponible. Por otro lado tenemos la resistencia a meticilina u oxacilina. Ésta consiste en la producción de una nueva proteína fijadora de penicilina (penicillin-binding protein) PBP, llamada PBP2a o PBP2’, no presente en las cepas sensibles.Cuando una cepa es resistente a meticilina significa que la cepa es resistente a todos los
antibióticos β-lactámicos (penicilinas, cefalosporinas y carbapenems). - 13RESISTENCIA A GLICOPÉPTIDOS La resistencia a glicopéptidos en estafilococos se ha descrito en aislamientos clínicos de estafilococos coagulasa negativos como S. haemolyticus y en los últimos años se comenzaron a describir aislamientos de S. aureus con sensibilidad disminuida y también resistentes a los glicopéptidos. Se necesitan todavía más estudios para establecer el exacto mecanismo molecular de resistencia a glicopéptidos.RESISTENCIA A MACRÓLIDOS
En S. aureus la resistencia a la eritromicina tiene dos fenotipos. El primero es conferido por
una modificación del rRNA blanco por enzimas constitutivas o inducibles que metilan un
residuo específico en el rRNA. Este evento resulta en una disminución de la unión a la eritromicina,
a otros macrólidos y a las lincosaminas. Los genes que codifican esta resistencia
se encuentran tanto en plásmidos como en el cromosoma. El segundo fenotipo abarca una
resistencia inducible a macrólidos. - 14RESISTENCIA A AMINOGLUCÓSIDOS 1. Una mutación cromosómica que codifica una alteración del sitio de acción en el ribosoma. 2. Transporte inefectivo, lo que produce una resistencia de bajo nivel. 3. La producción de enzimas modificadoras, el cual es el mecanismo más comúnmente encontrado. Estas se pueden codificar a nivel de transposones localizados en plásmidos o en el cromosoma.RESISTENCIA A QUINOLONAS
La resistencia a las quinolonas es debida a una actividad disminuida de la girasa, mediada
por mutaciones puntuales localizadas en el gen gyrA cromosómico, el gen estructural de la
subunidad A de la DNA girasa. Una mutación puntual en otro gen, el norA lleva a la disminución
de la acumulación de la droga dentro de la célula. Además las mutaciones en el gen
grlA cromosómico, confieren una resistencia de bajo nivel a las fluoroquinolonas. - 15PERFILES DE RESISTENCIA En nuestro país se pueden describir, en forma esquemática, la circulación de tres perfiles de resistencia. Uno esta constituido por cepas de S. aureus sensibles a meticilina u oxacilina, que en más del 90% de los casos son productoras de penicilinasa y, a veces, pueden tener determinantes de resistencia a macrólidos. El segundo perfil esta constituido por cepas resistentes a meticilina u oxacilina sin resistencia acompañante a otros grupo de antibióticos salvo, a veces, resistencia a macrólidos. El tercer perfil esta constituido por cepas multirresistentes que poseen resistencia a meticilina, asociada a resistencia a aminoglucósidos, quinolonas y macrólidos, donde prácticamente la única opción terapéutica es la vancomicina.STAPHYLOCOCCUS EPIDERMIS
El grupo de estafilococos coagulasa negativos está constituido por un gran numero de especies.
En la tabla 4 se pueden ver las especies relacionadas con patología humana. S. epidermidis es
una de las especies que más frecuentemente se aísla. Comparte las características del género
con respecto a la morfología y fisiología. En relación a la estructura, a nivel de la pared celular,
a diferencia de S. aureus, los puentes de pentaglicina del peptidoglicano no están presentes y
se sustituyen algunas moléculas de glicina por L-serina.
Con respecto a la patogenicidad, S. epidermidis es capaz de producir macromoléculas de
superficie y extracelulares, que inician y luego aumentan la adhesión bacteriana a la superficie
plástica de cuerpos extraños.
. La adherencia inicial de S. epidermidis parece estar mediada por
una adhesina polisacárida llamada PS/A y otras proteínas de superficie. La PS/A se trata de un
polímero de galactosa-arabinosa de alto peso molecular. - 16. Luego de la adherencia inicial, hay otra fase llamada de adherencia intracelular que es mediada por un polisacárido llamado PIA y una proteína extracelular. Esto permite la formación de varias capas de células bacterianas adheridas entre si que forman el llamado slime o biofilm. Las infecciones causadas por S. epidermidis se relacionan con la colonización de cuerpos extraños, especialmente en el paciente hospitalizado.
- 17La mayoría de las veces que aislamos S. epidermidis de una muestra clínica en el laboratorio de microbiología, este constituye un contaminante. Esta especie, al ser flora normal de piel, muchas veces contamina las muestras en el momento de la toma, creando dificultades para interpretar los resultados de los cultivos. Es el contaminante más importante en muestras de hemocultivo, líquidos biológicos o exudados de herida, donde su aislamiento debe ser interpretado con precaución, teniendo en cuenta las condiciones de extracción de la muestra y la condición clínica del paciente.Staphylococcus saprophyticus
Presenta características similares a S. epidermidis pero es resistente a la novobiocina y la composición
de los ácidos teicoicos es de fosfato de ribitol. Se encuentra ampliamente distribuido
siendo causante de hasta el 20% de las infecciones urinarias extrahospitalarias en mujeres
jóvenes, causan afecciones del tracto urinario bajo sin alteraciones estructurales. No presenta
problemas de resistencia antibiótica. - 18DIAGNÓSTICO MICROBIOLÓGICO Además de los datos clínicos y epidemiológicos, fundamentales para la orientación diagnóstica, es preciso confirmarlo con el diagnóstico microbiológico.TOMA DE MUESTRAS
Se realizará de la forma habitual, en procesos generalizados con posibilidad de bacteriemia se
realizarán hemocultivos. En el caso de procesos supurados se realizará la toma de la muestra
con aguja y jeringa, siempre que sea posible. Los estafilococos son bastante resistentes a las
condiciones ambientales adversas pero de todas maneras es necesario tomar precauciones en
el transporte y conservación de la muestra. - 19EXAMEN DIRECTO En el caso de procesos supurados, el examen directo de la muestra con tinción de Gram nos permitirá observar los cocos Gram positivos agrupados en racimos, junto a un gran número de leucocitos polimorfonucleares.CULTIVO
En cuanto a los requerimientos atmosféricos el género Staphylococcus es aerobio-anaerobio
facultativo, por tanto su crecimiento en caldo tioglicolato se hará en toda la extensión del
tubo. Desde el punto de vista nutricional es no exigente, por lo tanto crece tanto en medios
de cultivo pobres, como el agar simple, como en medios ricos, como el agar sangre ovina. - 20PRUEBAS BIOQUÍMICAS Las pruebas o ensayos bioquímicos son aquellas reacciones que ponen en evidencia la existencia de una enzima o pasos metabólicos determinados, y que muchas veces nos permiten llegar a la identificación a nivel de especie.
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- Beschreibung
- Karteikarten am PRUEBA2, erstellt von Tita Grandini am 18/05/2018.
- Erstellt von
- Tita Grandini
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