Medio de cultivo Luria Bertani

Medio de cultivo Luria Bertani

Medir 5.0 g de triptona, 2.5 g de extracto de levadura, 7.5 g de de Agar y 485.0 mL de agua desionizada en un frasco de 1 L.

Calentar y agitar el medio hasta que se vuelva traslucido.

Medir la acides con el papel pH y de ser necesario ajustar con solución de hidróxido de sodio a un pH 7.

Autoclaviar

En mechero

Agregar 500 uL de tetracilina a todos los frascos y 500 uL de

Ninguno

Estreptomicina

Ampicilina

Verter 20 mL de medio en las cajas petry rotuladas apropiadamente.

Esperar a que solidifique.

Agregar 100 uL de disolución de microorganismo de cultivo líquido. (solamente las cajas con tetraciclina)

Homogeneizar con esparsidor

Colocar las placas boca abajo con la tapadera puesta en la incubadora a 37 ºC por 24 horas.

Al día siguiente enumerar las colonias generadas en el medio.

Blue-white screening

40.0 uL de X-GlcA en solución y 10.0 uL y homogeneizar con esparcidor.

Esperar a que el medio absorba

Inoculación primaria

Transferencia de colonias