Transformación bacteriana

TRANSFORMACIÓN BACTERIANA

DIA 1

DIA 2

En un tubo eppendorf de 3 ml colocar alrededor de 200 µl de células competentes Escherichia coli DH5α

Adicione 20 µl del ADN a introducir en la bacteria

Mezclar cuidadosamente por inmersion e incubar en hielo por 20 min

Dar un choque térmico incubando a 42°C, de 30 - 60 "

Transferir inmediatamente a un baño de hielo por 10 min

Adicionar 1 ml de medio LB liquido

Incubar a 37 °C con agitación continua durante una hora

Plaquear en medio LB sólido que contiene antibiotico de selección apropiado (Kanamicina)

Cultivar las bacterias en caja de Petri, boca abajo, toda la noche, en incubadora a 37 °C

Observar directamente los resultados en las cajas de Petri

Determinar el número de unidades formadoras de colonia

Unidades Formadoras de Colonia (UFC).

Unidad formadora de colonia por centimetro cuadrado.

Unidades formadoras de colonia por ml.