Electroforesis en gel de agarosa: protocolo paso a paso

Prepare el molde para el gel

prepare una solución de 1.5% de agarosa en TBE 1X para cada gel

Agregue bromuro de etidio (10 mg/ml) a una dilución 1:20,000 (concentración final 0.5 μg/ml). Sí se realizará la tinción con SYBR Green agregar 5µL de SYBR Gold Green y mezclar

Prepare el gel vertiendo la solución en el molde

Sobre un pedazo de papel Parafilm coloque 5 μl de buffer de carga por cada muestra

calentar

Posteriormente agregue 10 μl de cada muestra a cada gota de buffer

Prepare el marcador de ADN: 5 μl del marcador más 5 μl del buffer de carga y 3 μl de agua destilada.

Ponga el gel en la cámara de electroforesis y cargue las muestras

Corra el gel aproximadamente a 100 V hasta que el azul de bromofenol (colorante azul fuerte) haya migrado aproximadamente 70-80% del largo del gel.

Visualice el gel teñido usando el transiluminador de luz ultravioleta