Flussdiagramm
enzimas
Inhalt des Flussdiagramms
Efecto de la concentración de enzima, el pH y la Temperatura
sobre la Actividad Enzimática
Catálisis enzimática.
Las enzimas son catalizadores biológicos que aumentan las velocidades de las reacciones bioquímicas.
solo actúa sobre determinadas moléculas,
denominadas sustratos mientras dejan el resto del sistema sin afectar.
puede contener en promedio alrededor de 3000 enzimas diferentes.
Es homogénea porque el sustrato y la enzima están presentes en disolución acuosa.
Pardeamiento enzimático
La coloración café oscuro en la superficie de frutas y vegetales, se llama pardeamiento, y se debe a la enzima tirosinasa
La coloración café en un pigmento muy oscuro llamado melanina.
monofenoloxidasa sobre el aminoácido tirosina, se va convirtiendo secuencialmente en dopa, dopaquinona
y dopacromo (café oscuro),
la velocidad de la reacción en términos
de la cantidad de L-metildopacromo que se va formando, o la de L-metildopa que va reaccionando:
La medida de la absorbancia a través del tiempo sirve para cuantificar la velocidad de la reacción
Obtención del extracto enzimático
Es una fracción de material animal, vegetal o microbiano, que contiene
una mezcla de varias sustancias.
La preparación general de un extracto enzimático se inicia con la adición al material seleccionado una solución amortiguadora.
Luego, se tritura en un mortero, se filtra y centrifuga para separar los residuos poco solubles.
Que se caracteriza por presentar actividad de una o varias enzimas.
Medida de la actividad enzimática
Las velocidades de varias reacciones enzimáticas se pueden usar para comparar la eficiencia de las enzimas en términos de la cantidad usada de éstas
Si se conoce con precisión la concentración molar de la enzima usada, la expresión anterior se llamará actividad molar de la enzima:
Si no se conoce las cantidades exactas de las enzimas, se puede usar como factor de comparación el volumen de los extractos enzimáticos
Variables que afectan la actividad enzimática
Las enzimas son macromoléculas proteínicas cuya actividad catalizadora se ve influenciada por varios factores
concentración del sustrato y de la enzima, la ausencia o presencia de cofactores, inhibidores y efectores, el aumento o disminución de la temperatura y las variaciones del pH.
Para garantizar el óptimo funcionamiento de una enzima, se tendrá que
proceder a la evaluación de su actividad catalítica.
midiendo la velocidad inicial de la reacción enzimática
en función , determinando la presencia o ausencia de un
sustrato o de un producto de la reacción
Efecto de la concentración de la enzima sobre la velocidad de la reacción
La evaluación del efecto de la concentración de la enzima se
hizo en la región de la curva hiperbólica de Vi vs [S]
la cinética es de orden cero con respecto al sustrato. Ahí, la enzima se encuentra completamente
saturada y habrá sustrato en exceso.
Al adicionar más cantidad de enzima, se encontró un aumento lineal en la
velocidad de reacción, proporcional a la cantidad de enzima agregada.
Efecto del pH sobre la actividad enzimática
La mayoría de las enzimas poseen un pH característico al cual su actividad es máxima; por encima o por debajo
de ese pH la actividad disminuye.
La relación entre el pH y la actividad de cualquier enzima depende principalmente del comportamiento ácido-base
de la enzima y del sustrato.
La forma de la curva de actividad-pH varía con la concentración del sustrato, ya que
el valor de KM de muchas enzimas varía con el pH.
Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática
la velocidad de las reacciones catalizadas por enzimas
se incrementa en general con la temperatura.
La velocidad de muchas reacciones enzimáticas se duplica, aproximadamente, por cada 10 ºC
de aumento de la temperatura.
las enzimas, al ser proteínas, se desnaturalizan por la acción del calor y se inactivan cuando la elevación de la temperatura sobrepasa un cierto punto.
Efecto de un inhibidor
son sustancias de diferentes naturalezas químicas, que pueden unirse a diferentes lugares de la enzima o de los complejos enzimas sustratos de forma covalente o no covalente.
Hace que la reacción se dé normalmente a una velocidad menor a la que se da cuando la enzima está libre. Dependiendo del tipo del inhibidor, la enzima puede inhibirse temporal o permanentemente.