TIPOS DE TINCIÓN

TIPOS DE TINCIÓN

1. TINCION NEGATIVA

   • Proporciona un resultado presuntivo de presencia de
     • Cryptococcus neoformans
       • Microorganismo causante de meningitis en px's con inmunosupresión
       • Se encuentra en 2 formas
         • Asexual
           • Levaduras encapsuladas
             • Visualización por tinta china
         • Sexual
   • Método
     • 1.- Depósito de la muestra clínica en porta objetos. Ej. LCR
     • 2.- Colocación del colorante (Tinta china).
       • Pinta el fondo color oscuro o negro.
         • La cápsula del C. neoformans permanece sin teñir.
     • 3.- Fase de secado
     • 4.- Observación de contrastes con microscopio sin necesidad de fijación.
   • Desventajas
     • Microorganismos se contraen en el periodo de secado.
       • 2da alternativa: TINCION NEGATIVA HUMEDA
         • Importante:
           • En px's con diagnóstico previo, no siempre se observa la capsula.
             • Por el tratamiento antifúngico dirigido a las cápsulas.
           • Diferenciar levadura doble con doble pared refrigerante con su capsula.
             • Confirmar diagnóstico inicial con cultivo.
         • Usos:
           • Proporciona información temprana sobre microorganismos patóenos.
           • Propiciar inicio de tratamiento adecuado.
           • Monitorización del tratamiento y pronóstico del px.
         • Ventajas
           • Microorganismos no se contraen
           • Sencilla y barata
         • Desventajas
           • Puede producir falsos positivos en presencia de
             • Levaduras de los géneros: Rhodotorula Candida Cryptococcus
             • Leucocitos
         • Método
           • Microorganismos se suspenden en una película de tinta china sobre el porta objetos
             • Se observan sin secado

2. TINCIÓN DE AZUL ALGODÓN DE LACTOFENOL

   • Tinción no considerada diferencial
     • Uso:
       • Para correcta identificación de hongos de interés clínico.
       • Fines de diagnóstico o estudios taxonómicos.
   • Fundamento
     • Fenol
       • Inactiva enzimas líticas e inactiva la célula.
         • Quita grado de patogenicidad.
     • Ácido láctico
       • Cambio de gradiente osmótico en el interior fúngico.
     • Azul de algodón
       • Colorante ácido
         • Tiñe citoplasma y quitina.
     • Glicerol
       • Mantiene la humedad.
   • Método de preparación
     • 1.- Colocar material en campana tipo 2A.
     • 2.- Pegar segmentos de 1cm de cinta adhesiva en masa micológica.
     • 3.- Colocar gota de azul de algodón en porta objetos.
     • 4.- Tocar parte superior del hongo con lado adhesivo de la cinta.
     • 5.- Colocar cinta sobre gota de azul de algodón y añadir otra gota.
     • 6.- Poner cubre objetos y observar en 40x.
   • Resultados
     • Estructuras fúngicas se observan de color azul sobre un fondo blanco.
   • Muestras útiles para su uso:
     • Hongos filamentosos aislados en medios de cultivo.

3. TINCION DE GRAM

   • Tinción diferencial para bacterias Grampositivas y Gramnegativas.
     • • Bacilos GRAM NEGATIVOS
         • Pared celular capa fina de peptidoglicano y membrana celular externa.
     • • Cocos GRAM POSITIVOS
         • Pared celular con capa gruesa de peptidoglicano, sin membrana celular externa.
     • La composición química y contenido de peptidoglicano determina las características tintoriales.
   • Método de tinción
     • 1.- Colocar colorante Cristal violeta
       • Tiene afinidad por el peptidoglicano de la pared bacteriana.
     • 2.- Colocar lugol.
       • Sirve como mordiente
         • Impide la salida del cristal violeta.
     • 3.- Colocar mezcla de alcohol - acetona
       • Deshidrata la pared bacteriana Cierra los poros de la misma Destruye membrana externa delas gramnegativas
     • 4.- Colocación de safranina.
       • Colorante secundario o de contratinción.
         • Tiñe bacterias que no pudieron retener el complejo cristal violeta - yodo.

4. TINCION DE WRIGHT

   • Tinción policromática para diferenciación de elementos celulares de la sangre.
     • Puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una célula.
   • Reactivo Wright compuesto por:
     • Eosina
       • Colorante ácido con afinidad a componentes alcalinos.
         • Colorea componentes citoplasmáticos conocidos como acidófilos.
           • Tonalidad resultante rosada - anaranjada para citoplasmas y rojo intenso en eritrocitos.
             • Efecto Romanowsky
     • Azul de metileno
       • Responsable de la tinción de los núcleos celulares
         • Color mayoritariamente morado.
           • Efecto Romanowsky
   • Muestras útiles para su uso: frotis de sangre periférica y frotis de médula ósea.

5. TINCION DE ZIEHL - NEELSEN

   • Resultados
     • Tinción positiva:
       • Color rojo fucsia
         • Bacilos ácido - alcohol R.
     • Evaluación y reporte de las laminillas:
   • Muestras clínicas útiles:
     • Expectoraciones
     • LCR
     • Líquido pleural
   • Método:
     • 1.- Colocar carbol - fuscina.
       • Colorante con afinidad a ácidos micólicos de la pared celular.
     • 2.- Calentar ligeramente.
       • Esto solubiliza ceras, lípidos y ácidos grasos de la pared.
         • Permite el paso del colorante
     • 3.- Enfriar con agua.
       • Solidificación de los componentes.
     • 4.- Colocar azul de metileno.
       • Contratinción.
   • Utilizada para diagnóstico rutinario de tuberculosis.
     • Basada en la composición química de la pared celular de micobacterias.
     • Tinción diferencial de bacilos ácido - alcohol resistentes.
       • Sensibilidad del 74%.

6. RODRIGUEZ RODRIGUEZ REBEKAH 2°B LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Y PARASITOLOGIA BIBLIOGRAFIA: López-Jácome, L. E., Hernández-Durán, M., Colín-Castro, C. A., Ortega-Peña, S., Cerón-González, G., & Franco-Cendejas, R. (2014). Las tinciones básicas en el laboratorio de microbiología. Investig. en discapacidades, 3(1), 10-18.

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