Ley de Lamber-Beer, aplicaciones en análisis cuantitativo.

Ley de Lamber-Beer, aplicaciones en análisis cuantitativo.

1. Desviaciones de la Ley de Lambert-Beer

   • n ocasiones desviaciones de la linealidad. En algunos casos se trata de limitaciones Inherentes a la ley conocidas como desviaciones reales, mientras que en otros casosson desviaciones aparentes.
     • Desviaciones reales
       • A concentraciones altas, aumentan las Interacciones entre las moléculas de soluto entre ellas o conel disolvente, con lo que se modifica la capacidad de las especies químicas para absorber la radiación.
     • Desviaciones aparentes
       • Pueden ser debidas 1 procesos químicos en los que se ve Involucrado el analito, o bien a las características del sistema Instrumental con el que se lleva a cabo la medición.
     • Desviaciones químicas
       • Aparecen como consecuencia de procesos químicos en los que participan las especies absorbentes, como pueden ser asociación, disociación o interacciones con el disolvente o con otras especies presentes, formando productos de diferente absorbancia específica
     • Desviaciones del sistema instrumental
       • Los factores que pueden ocasionar este tipo de desviaciones es la utilización de radiación no monocromática, lo que en sentido estricto ocurre siempre, ya que en la práctica no es posible aislar una radiación absolutamente monocromática.

2. Ley de Lamber-Beer

   • Esta ley relaciona la concentración de una solución y la capacidad de transmitir una radiación monocromá
     • En el caso de que se considere una radiación monocromática se verifica que la absorbancia es directamente proporcional a la concentración de la especie responsable de la absorción.
   • - Depende de la naturaleza del cromóforo y de las condiciones experimentales (disolventes, temperatura, pH)
     • - Paso óptico: longitud atravesada por la radiación electromagnética a través del medio absorbente
       • - La concentración de la especie absorbente (o del cromóforo).
   • Cuando en la muestra hay presentes varias especies que absorben la misma frecuencia de radiación la absorbancia que se obtiene es la suma de las correspondientes a cada una de las es la misma frecuencia que el analito.
   • La muestra, así como el disolvente, pueden dar lugar a efectos indeseables de reflexión o dispersión, además de absorción, debido a la presencia de imperfecciones, partículas de polvo, impureza, etc.

3. Metodología

   • - Selección de las cubetas apropiadas
   • - Selección de disolvente
   • - Tratamiento de la muestra
   • Realización de medidas: determinación de concentraciones de forma directa
   • Mantenimiento

4. Análisis cuantitativo

   • La base de la aplicación de los métodos espectrofotométricos al análisis cuantitativo es la ley de Lambert-Beer, que como se vio anteriormente Indica que la absorbancia de una sustancia
     • - Selección de la longitud de onda. En principio siempre se trabaja a la longitud de onda en la que la absorbancia de la sustancia analizadaes máxima, Así se consigue sensibilidad.
     • - Tras una preparación adecuada de la muestra si fuera necesario (eliminación de interferencias, desarrollo de color por adición de algún reactivo, etc.), se determina experimentalmente la relación absorbancia/concentración.
     • - Si en la disolución hay varias sustancias que absorben radiación, en muchas ocasiones podrá determinarse la concentración de la especie o especies de interés sin necesidad de separaciones previas, analizando los espectros de absorción de las sustancias presentes en la mezcla.
     • - Se mide la absorbancia de la muestra problema, y haciendo uso de la ecuación de la recta de calibrado, se determina la concentración de la especie absorbente.