PRUEBAS DE LABORATORIO INMUNOLOGICAS

PRUEBAS DE LABORATORIO INMUNOLOGICAS

1. QUIMIOLUMINISCENCIA

   • FUNDAMENTO
     • Es la produccion quimica de luz se producira al volver a su estado 'basal', con que la energia quimica absorbida se cedera. en forma de fotones , facilmente cuantificables
       • Permite la detección de concentraciones de analitico más bajos y el diagnóstico temprano de la enfermedad.
         • Más sensible que el ELISA.
           • Lee un rango dinámico de que aumenta 106 o 107 veces significativamente la linealidad del ensayo y la reducción de desbordamiento.
             • Resultados mas rapidos
   • APLICACION
     • Detecta sustancias químicas en las biopsias de tejidos
       • Delerminacion de ion calcio (II) inlracelular
         • Determinacion de enzimas
           • Determinacion de nitrogeno
             • Detecci6n de la hibridacion de sondas de ADN
               • Inmunoamilisis quimioluminiscemes
                 • Alteraciones del sistema inmune.
   • INTERPRETACION
     • Depende de que tipo del reactivo que se utilize en la prueba
       • Luminol
         • precisa de un oxidante fuente (HP2' 02' CIOo MnO.,d y medio a1calino p
       • Ester de acridinia
         • La emision del ester de acridinio, con un maximo a 10 0, I segundos de la inyecci6n del reaclivo de oxidaci6n y un tiempo medio de descenso de la intensidad de la quimioluminiscencia producida de I, I segundos, pcrmite obtener resultados reproducibles, integrando la cmisi6n durante 5010 5-10 segundos por muestra
         • Entre 0,3-4,3 moles de marcador por mol de proteina, dependiendo del lipo de proleina, su grado de purificadon y de la reladon molar inicial marcador/proteina
         • De inicial marcador/proteina. Incorporaciones superiorcs a 4,3 mol/mol, producen la insolubilizaci6n del producto marcado

2. REACCION DE WIDAL

   • FUNDAMENTO
     • Test basado en el principio de aglutinacion antigeno-anticuerpo determina la presencia de anticuerpos contra el antígeno O y H de la Salmonella typhi con ayuno de 8 horas
     • Los falsos negativos son a causa de : antibioticoterapia Utilizacion de corticoides,Inmunodeficiencias adquiridas y congénitas. Portadores crónicos de Salmonella typhi.Relacionadas a estandarización de la prueba.
     • Falsos positivos :causas baterianas,causas parasitarias virales , Hongos y causas no infecciosas
   • APLICACION
     • Diagnostico de fiebre tifoidea con un titulo Anti-O y Anti-H aislado
   • INTERPRETACION
     • Si los títulos iniciales se cuadruplican entre una y cuatro semanas la reacción negativa no excluye eldiagnóstico de fiebre tifoidea
     • Se considera positivo a fiebre tifoidea títulos anti-O y anti-H ≥1: 160-200 y ≥1: 50-100

3. PROTEINA C REACTIVA

   • FUNDAMENTO
     • Es una sustancia producida por el hígado en respuesta a la inflamación
     • Tiene alta sensibilidad
   • APLICACION
     • Aparece solo durante la fase activa del proceso inflamatorio.
     • identificar inflamaciones o infecciones
   • INTERPRETACION
     • ELEVADA EN: artritis reumatoidea activa, infecciones virales, tuberculosis, IAM, pos-operación quirúrgica, transfusiones
     • No siempre indica ausencia de inflamacion
     • <1,1 a 3 y > 3 indica sensibilidad
     • Si hay rango moderado y < 1 mg/dl en : Leucemias y enfermedades autoinmunes

4. ANTIESTREPTOLISINA O

   • FUNDAMENTO
     • Se detectan mediante una reacción inmunotógica de aglutinación.
     • AC del Estreptococo Beta Hemolítico del grupo A.
     • anticuerpos aparecen Los despues de una semana despues de la infeccion
   • APLICACION
     • Se solicita con determinacion seriada
     • El valor puede permanecer elevado durante meses
     • Daignostico de pioderma estreptococico y glomeronefritis postestreptococicas
     • Apoya al diagnostico de Fiebre reumatica
     • No son para diagnosticos definitivos pedir otra prueba extra
   • INTERPRETACION
     • 80% de infecciones producidas por Estreptococo, eleva el titulo de antiestreptolisina O
     • fiebre reumática (títulos superiores a 500 UI/ml).
     • Títulos ascendentes: infección de 4-6 semanas. V.R.: Hasta 200 UI/ml
       • Amigdalitis
       • Escarlatina
       • Enfermos ya curados
     • La prueba seriada si hay un aumento de mas de cuadro veces los titulos se confirma con respuesta inmunologica

5. FACTOR REUMATOIDE

   • FUNDAMENTO
     • Son auto anticuerpos IgM de diferentes clases de inmunoglobulinas dirigidas primariamente contra sitios específicos de la región Fc de moléculas de IgG o IgA
     • Tiene mas ventajas sobre otras pruebas
     • Se asocian a enfermedad mas grave
   • APLICACION
     • Diagnosticar Artritis reumatoide
     • Diagnostica enferedades reumaticas
     • Diagnostica enfermedades no reumaticas que presentan estimulacion antigenica cronica
     • No se recomienda a pacientes que presenten artralgias como sintomatologia
   • INTERPRETACION
     • aproximadamente 70 – 80 % en los pacientes con artritis reumatoide del adulto. Sensibilidad del método: 10UI/ml
     • Diagnostica Artritis reumatoide y la ausencia de deteccion del FR no excluye el diagnostico
     • La negatividad del factor reumatoideo indica enfermedad articular leve a moderada

6. ELISA

   • FUNDAMENTO
     • Método analítico que depende de la reacción Ag-Ac
     • Determinación de la [Ag] o un [Ac], mediante el uso de uno de ellos inmovilizado en fase sólida y el otro en solución.
     • Cualitativo, cuantitativo
     • Dependiendo del diseño: se puede emplear Ags, haptenos, o Acs marcados con una enzima, para revelar: Ags, Acs, hormonas o fármacos, presentes en los fluidos corporales.
     • El producto de la reacción, puede ser detectado y cuantificado mediante un marcador enzimático con un sustrato apropiado
     • De la reacción consiste; al suero problema se le agrega un conjugado que son anticuerpos dirigidos contra anticuerpos humanos o antígeno, los cuales se unirán a una enzima. Las enzimas son capaces de modificar al sustrato en presencia de un cromógeno produciendo un producto coloreado que es detectado visualmente o por un espectrofotómetro.
   • APLICACION
     • Hay tres tecnicas
       • DIRECTOS: se usan para la detección de antígenos.
         • INDIRECTOS: para la detección de anticuerpos. de clase IgG o IgA
           • ELISA tipo sándwich métodos para la detección de antígenos, el primer anticuerpo captura el antígeno de la muestra que es detectado a través del conjugado anticuerpo-enzima o amplificado con un conjugado dirigido contra el segundo anticuerpo
     • Acs utilizados Sensibilidad: capacidad del test de identificar individuos afectados. Especificidad: identifica individuos no afectados
       • Diagnostica
         • VIH (el virus que causa el SIDA) enfermedad de Lyme anemia perniciosa rickettsiosis exantemática de Ricketts rotavirus carcinoma escamoso sífilis toxoplasmosis virus varicela zóster (que causa varicela y culebrilla) y el COVID 19
   • INTERPRETACION
     • Depende de la afección que se pretenda detectar con la prueba
     • Para confirmar un diagnostico se recomienda la primera muestra y la segunda despues de semanas de haber realizado la primera
       • falsos positivos (falsos reactivos) Falsos negativos (falsos no reactivos):
         • Falsos negativos: cuando un individuo infectado con VIH tiene pruebas diagnósticas negativas o no reactivas.
           • Falsos positivos: cuando un individuo que no está infectado por VIH tiene pruebas diagnósticas positivas o reactivas frecuentes en las pruebas rápidas y sumamente infrecuentes en las confirmatorias hipergamaglobulinemia, vacunaciones recientes contra la hepatitis B, la rabia o la influenza, y por la presencia de anticuerpos con características similares a los anticuerpos anti-VIH

7. CITOMETRIA DE FLUJO

   • FUNDAMENTO
     • Es una tecnica que permite cuantificar y analizarcaracteristicas de celulas en suspension
     • Hace incidir uno o mas haces de laser de lngitud de onda definitiva sobre un chorro no turbulento de una solucion en la celula
     • Representa los datos de un numero de celulas importantes de celulas en suspension y el analisis de sus caracteristicas
     • Tiene tecnicas de inmunoflorecencia directa o indirecta de los leucocitos
   • APLICACION
     • Permite un marcaje de inmunoflorecencia directa
     • Identifica distintas subpoblaciones leucocitarias que son patron multiparametrico
     • Aplicaciones clinicas son
       • Cuantificacion de subpoblaciones linfocitarias para el diagnostico y seguimiento de diferentes inmunodeficiencias primarias y secundarias
       • Diagnostico ,seguimiento y deteccion de enfermedad minima residual de las homopatias malignas
       • Cuantificacion de celulas CD34+ para valorar la injertabilidad en muestras de medula osea o aferesis de sangre periferica
       • Deteccion de algunos antigenos del MHC para el dx de enfermedades autoinmunes mas alelos
   • INTERPRETACION
     • A medida que disminuyen los Linfocitos T CD4+, aumenta el riesgo de infecciones oportunistas, siendo el riesgo mayor con linfocitos T CD4+ menores a 200 cel/ml.
       • Inversión en el índice CD4+/CD8+, que normalmente es 2 a Seguimiento también es relevante las subpoblaciones linfocitarias T CD4+ y CD8+ pues con la terapia antirretroviral altamente efectiva los linfocitos T CD4+ comienzan a subir y el número de linfocitos T CD8+ tiende a normalizarse, esto se traduce en la restauración del sistema inmunológico y en la disminución del riesgo de infecciones.

8. ESTUDIANTE : DANIELA ANDREA ZURITA

   • PARALELO: 2
     • DOCENTE : DRA. VIOLETA ALEJANDRA FERNANDEZ GALVEZ

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