CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO

CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO IÓNICO

1. ¿Qué es?

   • Es un método que permite la separación de moléculas según su carga eléctrica.
     • Fases
       • Fase Estacionaria o Intercambio Iónico
         • Lleva en la superficie cargas electrostáticas fijas.
       • Fase Móvil
         • Suele ser una disolución acuosa y contiene especies iónicas en forma de buffer.

2. Fundamento

   • Las moléculas se adhieren a los intercambiadores de forma reversible
     • Por tanto
       • Las moléculas pueden ser asociadas o disociadas cambiando el ambiente iónico.

3. Propiedades

   • Intercambiadores Aniónicos
     • Portadores de grupos con carga positiva y unen aniones reversiblemente.
   • Intercambiadores Catiónicos
     • Portadores de grupos con carga negativa y unen cationes reversiblemente.

4. Procedimiento

   • Se compone de Cuatro Etapas
     • Aplicación y Lavado
       • Consiste en sembrar la muestra que deseamos filtrar.
     • Equilibrio
       • Fase estacionaria con condiciones iniciales deseadas.
     • Elusión
       • Las moléculas captadas son eluídas por cambios en el buffer.
     • Regeneración
       • Se remueven las resinas aún asociadas al intercambiador.

5. Factores que afectan la retención

   • Tiempo de retención
     • Basada en la atracción Iones del soluto-carga complementaria de la fase estacionaria.
   • pH
     • Influye directamente en el tiempo de retención según el pH de la resina.
   • Cargas
     • Fuerza de retención es mayor y la de elusión es menor mientras más cargado sea el compuesto.
   • Gradiente
     • Aumentando la concentración de la fase móvil se favorece la competencia con la mestra.
   • Porosidad
     • El tamaño del poro de la resina influye en la unión.