ELEMENTOS DE CRIMINALÍSTICA. LA PRUEBA DEL ADN

ELEMENTOS DE CRIMINALÍSTICA. LA PRUEBA DEL ADN

1. INTRO

   • CRIMINALISTICA
     • DEFINICIÓN
       • Ciencia que, con técnicas y procedimientos específicos, trata de establecer la identidad de las personas
     • CLASIFICACIÓN
       • POLICIAL
         • Trata de determinar la identidad de las personas a través del examen de
           • HUELLAS
             • Toda señal o marca del paso de una persona por un lugar
           • RASTROS
             • Elemento o restro indiciario que permanece en el lugar luego de un hecho (Ej. manchas de sangre y semen)
       • MEDICOLEGAL
         • HERRAMIENTAS
           • Odontología forense
           • Radiología forense
           • Estudio de manchas
           • Estudio de pelos
           • Estudio de restos óseos
           • Prueba de ADN
         • DEFINICIÓN
           • Ciencia que trata de llegar a establecer la IDENTIDAD de una persona que ha dejado su huella biológica en un hecho, así como la de cadáveres y restos humanos
   • IDENTIDAD
     • DEFINICIÓN
       • Es el conjunto de elementos o características biológicas que hacen que un individuo sea igual a sí mismo y diferente al resto de la población

2. GENETICA Y MLEGAL

   • MARCADORES GENÉTICOS
     • FILACIÓN/TEORÍA GENÉTICA
       • DEFINICIÓN
         • Hace referencia indistintamente a la paternidad o a la maternidad así como a la relación de un descendiente con respecto a sus ascendientes
       • TEORÍA GENÉTICA
         • El individuo no puede presentar un determinado marcador genético si no lo presenta, por lo menos uno de sus padres
         • El individuo debe, necesariamente, presentar aquellos marcadores genéticos para los cuales uno de sus progenitores sea homocigoto
     • GRUPOS SANGUINEOS
       • SISTEMA ABO
         • Fenotipos determinados por antígenos de superficie de GR. Los elementos determinantes de grupos A y B son glucoproteínas. Herencia mendeliana = genes ABO se heredan uno de c/progenitor. 20% de los progenitores falsamente alegados como puede ser excluÍdo de esa condición = sin certeza biológica
       • SISTEMA Rh
         • Fenotipos determinados por antígenos de superficie de GR. Herencia mendeliana y en bloque, por lo que el individuo hereda tres alelos Rh en bloque del padre y lo mismo de la madre. Con la combinación de los sistemas ABO y Rh, el 30% de los progenitores falsamente alegados puede ser excluído = sin certeza biológica
     • HLA
       • DEFINCIÓN
         • Comprende un sistema de antígenos, cuyos genes se encuentran en el sexto par cromosómico.
       • HERENCIA
         • Herencia mendeliana y en bloque Representa un Capacidad de exclusión= 95%. "Certeza biológica" = Confirmar como descartar el vínculo con alto grado de incertidumbre
     • POLIMORFISMO DEL ADN
       • DEFINICIÓN
         • PATRÓN GENÉTICO/AUTOSÓMICO
           • BASE DE DATOS DE FRECUENCIAS ALÉLICAS
             • HAPLOTIPO Y
               • DEFINICIÓN
                 • Conjunto de alelos presentes en zona polimórfica/microsatélites con capacidad identificatoria ubicada en el cromosoma Y (varón)
               • HERENCIA
                 • Se transmite de padres a hijos de sexo masculino. Todos los hombres pertenecientes a una misma patrilínea lo tendrán
               • TÉCNICA IDENTIFICATORIA
                 • Señala la pertenencia de un individuo a un grupo familiar cuyos miembros varones comparten una línea de descendencia paterna común. Es de reconocida utilidad, a la hora de complementar estudios de evidencias biológicas que proporcionan poca información en cuanto a patrones autosómicos o análisis de parentescos biológicos alejados
             • Sustrato informativo esencial que permite saber la prevalencia en la población de cada uno de los alelos que la representa. Esta base es importante porque los alelos que resultan caracterizados por el conjunto de marcadores empleados para obtener un perfil o patrón genético no observan una distribución poblacional uniforme
           • Conjunto de polimorfismos formado por varios microsatélites o STR's ubicados en distintos cromosomas autosómicos. Número de microsatélites: entre doce y quince. Permite efectuar comparaciones requeridas entre las personas y rastros biológicos investigados en lo distintos casos
         • Zonas de repetición que se hallan dentro de los intrones (secuencias sin info p/ sintetizar proteínas) caracterizadas por presentar distinto número de repeticiones en los diferentes individuos. Permite individualizar. Ej. MICROSATÉLITES ó STR'S (zonas polimórficas seleccionadas para estudios de filiación que consisten en secuencias cortas de ADN formadas por escasa cantidad de nucleótidos). Análisis permite lograr un perfil o patrón genético = capacidad de exclusión altísima para diferencias de personas e identificar la proveniencia de una muestra biológica (por ser cortas sobretodo) = HUELLAS DIGITALES GENÉTICAS.
       • ADN MITOCONDRIAL
         • DEFINICIÓN
           • Señala la pertenencia de un individuo a determinado grupo familiar: matrilineal
         • TIPIFICACIÓN
           • HERENCIA
             • TÉCNICA IDENTIFICATORIA POR ADN MITOCONDRIAL
               • Limitada especificidad = una determinada población pueden existir individuos no emparentados con igual secuencia mitocondrial
               • Elevada sensibilidad = gran cantidad de copias que tiene, por lo que suele complementar la investigación de indicios biológicos que contegan ADN nuclear muy degradado o de vínculos biológicos alejados que conserven una matrilínea.
             • Se transmite de la madre a los hijos de ambos sexos, si bien solo las hijas pueden a su vez transmitirlo a sus descendientes.
           • SEGMENTOS HIPERVARIABLES
             • REGIÓN HIPERVARIABLE I
             • REGIÓN HIPERVARIABLE II
             • SECUENCIA MITOCONDRIAL
               • Pequeño tramo de ADN mitocondrial que representa el conjunto de variaciones presentes en ambas regiones hipervariables que caracteriza a una persona y la diferencia de otra no emparentada con la primera por vía materna
     • PROTEÍNAS PLASMÁTICAS
       • Detección de áreas polimórficas por medio de técnicas electroforéticas. Carácter hereditario mendeliano = buena capacidad de exclusión, aunque su análisis es dificultoso técnica y estadísticamente
   • APLICACIONES
     • ÁMBITO CIVIL
       • Establecimiento del nexo biológico con los progenitores allegados
         • Investigación de parentescos biológicos más alejados: abuelos, hermanos y tíos especialmente en ausencia de padres
           • Estudios de filiación con respecto a las personas fallecidas
     • ÁMBITO LEGAL
       • Identificación de cadáveres y restos humanos provenientes de una catástrofe
         • Estudio de manchas de sangre o de otro material biológico y su compatibilidad con la pertenencia a un sospechso
           • Estudio del semen proveniente de manchas o extraído del recto, vagina o boca en casos de delitos sexuales

3. TOMA DE MUESTRAS

   • INTRO
     • A través de estas determinaciones puede surgir la confirmación de la identidad del autor de un delito o bien su exclusión.
       • IMPORTANTE! CADENA DE CUSTODIA
   • SANGRE RECIÉN EXTRAIDA
     • SALIVA
       • MANCHAS ORGÁNICAS: SANGRE, SALIVA, SEMEN
         • HISOPADOS: VAGINAL, RECTAL, BUCAL
           • MUESTRA DE ORINA
             • PELOS CON BULBO O SIN BULBO
               • MATERIAL CADAVÉRICO
                 • TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
                   • CONSERVACIÓN
                     • 24 a 36 horas: t° ambiente o en heladera a -4°C
                     • Lapso mayor: congelación a -20°C a -70 °C. Descongelar solo para procesamiento
                     • Los huesos de cierta antigüedad que se encuentren libres de tejidos y de humedad deben permanecer a t° ambiente, resguardados del calor y la humedad
                   • Es aconsejable que el traslado de las muestras, se realice en envases de telgopor con hielo seco o bien si se trata de un trayecto corto, en hielo común, p/que impida su descongelamiento durante el traslado
                 • EXTRACCIÓN
                   • MATERIAL DE ELECCIÓN
                     • Material de elección: huesos (preferentemente zona interna de huesos largos); piezas dentarias (2 o 3, sin endodoncia); tejidos blandos (músculo y piel en cadáveres con escasa transformación biológica)
                   • CANTIDAD
                     • Volumen no menor de 5 cc, la muestra recomendada es de 100 cc
                   • INSTRUMENTAL
                     • Pinzas y bisturíes estériles o limpios, sin contaminación con tejidos de otro cadáver. Frascos limpios e irrompibles
                   • CERRADO
                     • Hermético y rotulado
                   • RESTOS HUMANOS FRAGMENTADOS E IRRECONOCIBLES
                     • Tomar una muestra por cada resto que no se encuentra unido por puentes de tejido que lo una a otro fragmento
               • EXTRACCIÓN
                 • Seleccionar de 5 a 10 pelos (de ser posible)
               • No es material de elección como muestra indubitable, sólo se analiza cuando constituye evidencia
               • CONSERVACIÓN
                 • Conservar en sobres de papel limpios, a t° ambiente
             • EXTRACCIÓN
               • 20-30 ml recién emitida. Obtención inmediata del sedimento. Cerrado hermético. Rotulación igual que la de la sangre
             • CONSERVACIÓN
               • Se recomienda el procesamiento del sedimento. De no ser posible, congelar.
           • EXTRACCIÓN
             • Utilizar material estéril para hisopados sin otros aditivos. Recolectar la mayor cantidad posible de exudado de la cavidad investigada. Secar el hisopado al aire ambiente antes de introducirlo en el tubo de plástico. Cerrado hermético. Rotulación igual que la de la sangre
           • CONSERVACIÓN
             • 24-36 horas: a t° ambiente o en heladera a -4°C
             • Lapso mayor: congelación a -20° o a 70°C. Preservar la humedad.Descongelar solo para el procesamiento
         • EXTRACCIÓN
           • Recortar la superficie manchada o recuperar la mancha desde distintas superficies mediante las técnicas apropiadas (raspado o hisopado). Secar las manchas húmedas y guardar las muestras en envases de papel para que no concentren humedad. Cerrado hermético. Rotulación.
         • CONSERVACIÓN
           • Temperatura ambiente (proteger del calor, de la humedad, y radiación ultravioleta intensa) Utilidad durante meses!
       • EXTRACCIÓN
         • Hisopado amplio de mucosa bucal. Tomar 4 a 8 hisopos por persona de cara interna de las mejillas. Secar a temperatura ambiente y guardar en sobres de papel, preservándolos de la humedad y de altas t°.
       • CONSERVACIÓN
         • Si la muestra debe conservarse por tiempo prolongado se recomienda utilizar un freezer teniendo presente la necesidad de evitar que la humedad contamine la muestra
     • EXTRACCIÓN
       • Aprox 5-10 ml
       • TUBOS
         • CONSERVACIÓN
           • 24-36 horas a T° ambiente o en la heladera a -4°C
           • Lapso mayor: congelación a -20°C a -70°C. Descongelar solo para el procesamiento
         • Estériles, irrompibles. 0,5 ml de EDTA al 5%. Cerrado hermético con rotulación indeleble con nombre, fecha de extracción y carátula o número de causa y juzgado interviniente
       • PAPELES DE FILTRO O ESPECIALES PARA ESTA RECOLECCIÓN
         • Embeber todo el espesor y la circunsferencia señalada en el papel o en su defecto no menor de 1 cm. de diámetro. Secar a t°ambiente
         • CONSERVACIÓN
           • Dentro de un sobre limpio alejado de la humedad y a t°ambiente