Caracterización de Carbohidratos

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• Caracterización de Carbohidratos

• Existen varias pruebas para identificar glúcidos o clasificarlos 

• Prueba de Molish

• Prueba de Benedict

• Prueba de Barfoed

• Prueba de Bial

• Prueba de Seliwanoff

• Reacción del lugol

• Prueba de Fheling

• Glucosa en sangre

• Considerada reacción universal ya que permite detectar la presencia de cualquier carbohidrato.

• Fundamento:  El ácido sulfúrico concentrado actúa como hidrolizante y deshidratante en los monosacáridos formando compuestos furfuralicos,  que a su vez se condensan con el reactivo de Molish, causando la formación de un anillo de color rojo-violeta en la interface.

• Resultados

• Positivo: formación de anillo rojo-violeta en la interface. Alta concentración:  precipitado rojo

• Negativo: No hay cambio de coloración

• Perimite reconocer azúcares reductores, (los que poseen un grupo OH anomérico libre) 

• Fundamento:  Reacción de óxido-reducción en la que el grupo carbonilo de los aldehídos se oxida a ácido y reduce la sal de cobre II (presente en el reactivo), en medio alcalino, a óxido de cobre I, el cual forma un precipitado de color rojo ladrillo.

• Resultados

• Negativo: No hay cambio de coloración (se mantiene azul)

• Positivo: Presencia de precipitado color naranja o rojo ladrillo

• Perimite reconocer azúcares reductores y  diferenciar a los azúcares monosacáridos de los disacáridos

• Fundamento:  Reacción de óxido-reducción basada en la reducción de cobre (II) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.

• Resultados

• Positivo: Monosacáridos: Rojo  Disacáridos: Azul (la reacción tarda más tiempo)

• Negativo: No hay cambio de coloración 

• Indentifica pentosas y ciertos ácidos urónicos (que al calentarse con ácidos fuertes forman pentosas)

• Fundamento: En medio ácido y alta temperatura, las pentosas y hexosas se deshidratan formando furfural e hidroximetilfurfural. En presencia de ión férrico y orcinol, el furfural se condensa formando un complejo coloreado.

• Resultados

• Negativo: No hay cambio de coloración 

• Positivo: Pentosas: Azul- verde Hexosas: Café o café rojiza

• Identificación de cetosas

• Fundamento: En medio ácido concentrado las cetosas se deshidratan más rápido que las aldosas, produciendo derivados del furfural que forman complejos con el resorcinol (del reactivo de Seliwanoff)

• Resultados

• Positivo: Color rojo cereza

• Negativo: No hay cambio de coloración 

• Detecta la presencia de polisacáridos 

• Fundamento: Se basa en la formación de un complejo entre la molécula de amilosa y el ión  I3- . El ión se introduce en la hélice de la amilasa formando un producto azul o negro

• Resultados

• Negativo: No hay cambio de coloración 

• Positivo: Color azul o negro según la concentración

• Determina la presencia de azúcares reductores y aldosas. También útil para determinar la hidrólisis de almidón.

• Fundamento: El carbonilo de los aldehídos se oxida a ácido y reduce la sal de cobre en medio alcalino a óxido de cobre, formando un precipitado de color rojo.

• Útil para determinar la hidrólisis del almidón realizada con ácidos diluidos o enzimas (amilasa)

• Resultados

• Negativo: No hay cambio de coloración 

• Positivo: Precipitado color rojo

• Pruebas para determinar la cantidad de azúcares en sangre mediante reactivos enzimáticos

• Fundamento: La enzima glucosa oxidasa oxida la D-glucosa a ácido D-glucónico y la peroxidasa descompone el peróxido de hidrógeno formado en la reacción anterior, lo que reacciona con fenol y 4 aminofenazona generando un complejo de color rosa.

• La intensidad del color indica la concentración  de glucosa. Para obtener un resultado cuantitativo se lleva las muestras al espectrofotómetro con absorbancia de 505nm y se aplica la fórmula.

• Formula (binary/octet-stream)