TINCIÓN HEMATOXILINA EOSINA

TINCIÓN HEMATOXILINA EOSINA

La tinción hematoxilina-eosina corresponde a la mezcla de hematoxilina y eosina.

El método supone la aplicación de la tinción de hematoxilina, que tiñe estructuras acidas (basófilas) en tonos azul y púrpura, y el uso de eosina que tiñe componentes básicos (acidofilos) en tonos de color rosa.

HEMATOXILINA

EOSINA

Es un producto natural que al ser oxidado constituye una substancia de color morado oscuro denominada hemateína.

Se utiliza en histología para teñir los componentes aniónicos (ácidos) de los tejidos, a los que da una coloración violeta. Tiñe intensamente los núcleos de las células, dado que estos contienen ácidos nucleicos ricos en radicales ácidos.

Se trata de una solución de eosina.

Colorante ácido. Utilizado como colorante de contraste de la hematoxilina en la tinción Hematoxilina-Eosina.

TÉCNICA

Sumergir los preparados histológicos en xilol para eliminar los excesos de parafina. (IMPORTANTE: EL XILENO ES UN HIDROCARBURO AROMÁTICO DERIVADO DEL BENCENO; NO ES UN ALCOHOL. Y ES MUY TÓXICO Y CANCERÍGENO), pero existen reactivos (como el NEO-CLEARE) que ejercen la misma función aclarante de parafina sin la toxicidad del xilol.

Luego pasan por una serie de alcoholes en concentración decreciente para rehidratar la muestra (100°, 95° y 70°).

Se lava en agua para eliminar exceso de alcohol

Se sumerge en hematoxilina por 5 minutos,

luego se lava en agua para eliminar excesos

se pasa rápidamente por alcohol ácido (sumergir).

Se lava nuevamente en agua corriente, chorro débil

Se pasa rápidamente por agua amoniacal o alcohol amoniacal (sumergir) hasta alcanzar un azulamiento

Se pasa por otra serie de alcoholes, esta vez en orden creciente (70°, 95° y 100°)

Se sumerge 4 a 5 minutos en eosina

Se lava nuevamente en agua corriente, chorro débil

Se pasa por otra serie de alcoholes, esta vez en orden creciente (70°, 95° y 100°) para deshidratar la muestra y que se pueda realizar el montaje con un pegamento no soluble en agua.

Finalmente se deja remojar 15 inmersiones en 2 xiloles, antes de realizar el montaje final.