Transporte a través de la membrana.

Transporte a través de la membrana.

A) Preparación de las celulas de levadura

Etiquetar cuatro tubos ensayo de la siguiente manera.

D

(a, b, c, d y e)

Pipetear en cada uno los volumenes impresos en la Tabla 1 del manual.

Invertir los tubos para mezclar de manera más eficaz.

Hervir el tubo D por 20 mins y dejar en hielo para enfriar

Transporte a través de la membrana.

B) Incubación de las celulas de levadura

Etiquetar cuatro matraces Ernlenmayer de 250 ml de la siguiente manera.

D

(a, b, c, d y e)

Agregar 100 ml de solución glucosa 2 (0.3%) a cada uno y mezclar perfectamente

Tomar alicuota de 10ml de cada matraz, etiquetar como tiempo 0 y tapar con algodo.

Incubar a 37 °C con agitación, tomar el tiempo y tomar una alicuota de 10 ml al llegar a los 15 mins

Etiquetar los tubos resultantes como tiempo y realizar lo mismo con los tiempos:

30, 45 y 60 mins

​​​

Centrifugar los tubos a 5000 rpm durante 5 mins.

Transporte a través de la membrana.

C ) Cuantificación de glucosa. Metodo ​​​​Nelson-Somogyi

Etiquetar cinco tubos ensayo, del 1 al 5 y etiquetar de manera diferente 16 más.

Pipetear en cada uno los volumenes mostrados en Tabla 2 y Tabla 3.

Invertir los tubos para mezclar eficazmente hasta que la efervescencia desaparezca.

Agregar 7 ml de agua destilada

Leer los tubos en espectrofotómetro a 540 nm, usar celdas de cuarzo de 3 ml y establecer al tubo #1 como blanco.

Observar, describir y registrar los resultados.

Desechar el contenido de todos los tubos en contenedores asignados.

Fin de la práctica