Práctica 3

Práctica 3

Colorantes

Origen animal

Origen mineral

Origen vegetal

Según su origen

Tinción

Es un método sencillo para incrementar contraste entre célula y entorno

Frotis

Es la extensión de una muestra de fluido corporal sobre un portaobjeto

Secado

Fijación

Coloración

La preparación de la muestra se debe realizar al momento de la tinción

Tipos de preparaciones

Fresco

Fijas

Observa la movilidad y el tamaño en estado natural

-Observación sin movimiento

-Largos periodos

Observación díficil por índices de refracción

Deben verse de inmediato

Objetivo de inmersión

Objetivo 40x

Según su característica

Según el microorganismo que tiñen

Hongos

Parásitos

Virus

Bacterias

Tinción de Gram

Tinción de Ziehl Nielsen

Bacterias gram + (azules)

Bacterias gram - (rojas)

Para microorganismos ácido-alcohol resistentes

Micobacterias

Nocardias

Parásitos unicelulares

Inmunofluorescencia

Fluorocromos se fijan a los anticuerpos. Se estimula radiación de onda visible

Naranja de Acridina

Auramina-rodamina

Blanco de calcoflúor

Tinta china

Azul de algodón de lactofenol

Tinciones para diagnóstico para micosis

Destaca la presencia de la cápsula

Tinción negativa

Alternativa rápida para diagnóstico de meningitis

Cryptococus neoformans

-Hifas

-Tubos germinales

-Esporas

Tinción de PAS

Tinción de metelamina de plata

Lugol

Giemsa

Wright

Hematoxilina férrica

Kinyoun

Parásitos en materia fecal

-Parásitos sanguíneos

-Examen de protozoarios

-Técnica de citoconcentración

Tipos de células de la sangre

Examen de protozoarios

Protozoarios intestinal

Estadios de protozoarios patógenos

Heces, trofozoítos o infecciones mixtas

-Bacterias y parásitos ácido alcohol resistentes

-Modificación de Ziehl-Nielsen (no utiliza calor)

Cryptosporidium

Fijación

Al calor

Química

Se forma una película en un portaobjetos

Se calienta por la llama del mechero

Con alcohol

Protege estructuras finas

Se une a proteínas o a lípidos para inactivarlos

Etanol

Ácido acético

Cloruro de mercurio

Formaldehído

Glutraldehído

Cristal violeta (básico)

Lugol (mordiente)

Alcohol acetona (decolorante)

Safranina (contraste)

Presencia de membrana de peptidoglucano

Fijación

Cristal violeta: Unión a pared celular

Lugol (yodo): fija al cristal violeta

Decolorante: Gram + retienen el violeta

Safranina: Gram - retienen safranina por lípidos

Carbolfucsina: Interactúa con ácidos grasos

Alcohol ácido: Decolorante, BAAR+ retiene colorante

Azul de metileno o verde de malaquita: colorante de contraste (BAAR-)

Frotis de sangre

Azul de metileno y Azur (básico, núcleos)

Eosina (ácido, comp extracelulares)

Trypanosoma cruzi

Plasmodium falciparum

Punción capilar entre el pulpejo y la uña

La gota se deposita en la laminilla a 45 grados

Frotis gota gruesa: Trypanosoma y plasmodium

Frotis fino: Malaria

Exudado faríngeo

Muestras fecales

Heces: Lugol, hematoxilina férrica, kinyoun, Ziehl nielssen

Samgre: Wright y Giemsa

Hisopado: Gram

Los frotis sanguíneos se fijan por medios químicos

Se calienta

Alcohol + ácido clorhídrico

AAR: + (rojo), AAR: - (azul)

Gota gruesa: se coloca a la mitad del portaobjetos y se van poniendo gotas encima