Electroforesis

Electroforesis

La técnica de separación de moléculas cargadas eléctricamente.

Obtención de las muestras de ADN

Preparación del gel de agarosa

Preparación de las muestras con el buffer de carga

Carga de las muestras

Teñido del gel

Corrida del gel

Visualización del gel con la luz ultravioleta y análisis de resultados

-En un tubo de microcentrífuga adicione 1 de marcador molecular (Hind III), 3 de tampon TEII y q de tampon colorante 6X

-Llevar a baño María a 65º C por 10 min.

-Transferir el tubo con la mezcla a hielo por 10min.

-Pesar la agarosa para la concentración de 0.8% y adicionar tampón TAE IX.

-Disolver la agarosa en baño maría hasta no observar grumos y que el color sea transparente.

-Dejar enfriar y adicionar 5 desafe view green.

-Preparar la bandeja de la cámara de electroforesis.

-Dejar solidificar la agarosa.

-Sobre el papel de parafina colocar 2 de azul de bromofeno y adicionar 5 de DNA.

-Homogeneizar las muestras con cuidado y adicionar cada una en los pozos correspondientes.

-Posicionar los electrodos en la cámara de electroforesis.

-Encender la fuente de energía y seleccionar el voltaje y el tiempo de corrida.

-Después de la corrida apagar la fuente y remover los electrodos.

-Retirar el gel de agarosa de la cámara de electroforesis.

-Visualizar los resultados en un transiluminador de luz ultravioleta.