Agrobacterium

Agrobacterium

1. Transfiere

   • T-DNA: en plasmido Ti o Ri (root-inducing)
     • Vectores binarios
       • Dos replicones
         • Genes vir
         • Regiones T-DNA
       • Utilidad
         • Funcionar en E.coli
       • Propiedades
         • Secuencia de borde (25pb) altamente conservados
         • Genes de selección (e.g. resistencias)
         • Múltiples sitios de corte
         • Origen(es) de replicación
         • Resisntencias a antibióticos en el cromosoma
     • Alternativos
       • Usar T-DNA desde el cromosoma
         • Reduce: frecuencia de transformación, integración de transigentes
   • Plantas
   • Hongos
   • Células animales
   • a
   • Necesita:
     • Secuencias de borde T-DNA para orientar y delimitar región de procesamiento del plásmido
     • Genes vir en plásmido Ti/Ri (10 operones)
       • Sentir compuestos producidos por heridas para activar VirA y VirG
         • Compuestos fenicios
         • Azucares
           • percibidas por proteína ChvE
       • Procesar T-DNA
         • VirD1: helicasa
         • VirD2: endonucleasa
           • se une extremo 5´de hebra T, la guía afuera de la bacteria, dentro de célula vegetal y dentro del núcleo de la planta
       • Secretar ADN-T y proteínas Vir por sistema de secreción tipo IV
         • virB
           • 11 genes: forman poros en membrana bacteriana
         • virD4
           • Funciona como un factor de acoplamiento para unir VirD2-T al sistema IV de secreción
         • Proteínas conocidas: VirD2, VirD5, VirE2, VirE3, VirF
       • Participa en tráfico citoplásmico, ubicar el núcleo y en la integración al genoma del hospedero
         • VirE2
           • Protege hebra T
         • VirD2 y VirE2
           • hebra T al núcleo
         • VirF
           • Quita proteinas de habrá antes de integración al ADN-T
     • Varios genes chu (virulencia cromosomal) en cromosomas bacterianos
       • Involucrados en: síntesis de polisacaridos, maduración y secreción