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Description
Flashcards by YASMIN BEATRIZ FRANCA MOURA, updated more than 1 year ago
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Created by YASMIN BEATRIZ FRANCA MOURA
over 2 years ago
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| Question | Answer |
| O que é extração de DNA e de onde pode-se extrair? | Seria o primeiro passo para realizar metodologias da biologia molecular na maioria das vezes. Pode ser extraído de inúmeros tipos de tecidos e células, |
| Quais os dois processos que estão envolvidos e com o que é feita e extração na maioria das vezes? | A extração é feita com basicamente o processo da lise celular e a purificação do DNA. Na grande maioria das vezes são utilizados kits que já vem os reagente e o manipulador segue os passos. |
| Como é o processo de lise? | Para o processo de lise as amostra são adicionada em uma solução especial e no caso de amostras vegetais são submetidas a moagem ou maceração antes. |
| Como é o processo de purificação? | Purificação é feita pra separar o DNA dos restos celulares ou das protéinas, sendo precipitado por centrifugação e suspenso em água ultrapura ou soluções-tampão adequadas. |
| Como melhorar a purificação em alguns casos? | As amostras de DNA podem também ser submetidas a processos de concentração, para ficar mais puro com a finalidade de se obter melhores resultados nas amplificações. Isso dependerá do tipo de amostra que será estudada. |
| Do que a Reação em Cadeia Polimerase (PCR), depende para fazer réplicas de um região específica do DNA in vitro? | O processo a contece em ciclos repetitivos que se iniciam com aquecimento. A reação depende da enzima Taq polimerase devido a sua resistência a altas temperaturas, a DNA molde, primers de iniciação de síntese e nucleotídeos. |
| Quais são as etapas da PCR? | 1- Desnaturação - fita dupla se transforma em simples 2- Anelamento - Resfria reação para primers ligarem-se ao molde 3- Extensão: Aquece para a taq polimerase estenda os primers para a síntese das novas fitas. |
| Em média, os ciclos se repete em quantas vezes e como pode-se visualizar o resultado da síntese? | Isso ocorre de 25 a 35 vezes podendo durar 2 a 4 horas. Podendo gerar vária cópias de uma vez. Seu resultado é visualizado com a eletroforese. |
| Em que a PCR é aplicada? | A PCR é muito utilizada em ciências forense, testes genéticos, diagnósticos e outras finalidades. |
| o que é eletroforese? | A eletroforese é uma técnica de separação que se baseia no princípio de migração de íons em um campo elétrico. |
| Para que serve a eletroforese? | permite realizar a separação de macromoléculas como DNA, RNA, proteínas e enzimas com tamanhos e cargas diferentes. |
| Em que ano foi empregada pela primeira vez? | Essa técnica foi empregada pela primeira vez em 1937 pelo bioquímico Arne Tisélius. |
| Como funciona a máquina técnica da eletroforese? | A técnica de eletroforese consiste em se aplicar o gel para a separação de moléculas através do peso molecular, em seguida a fonte de eletroforese cria uma corrente elétrica e para a visualização se utiliza a luz UV de um transiluminador. |
| Alguns tipos de eletroforese? | Eletroforese em gel de agarose. Eletroforese em gel de poliacrilamida. Eletroforese desnaturante. Eletroforese capilar. |
| O que significa PCR em tempo real? | A reação de amplificação em tempo real é uma ‘’variante’’ da reação de PCR convencional. |
| Como é realizado a técnica de PCR em tempo Real? | Seu princípio se baseia na duplicação de cadeias de DNA “in vitro” que pode ser repetida diversas vezes, gerando quantidade de DNA suficiente para realizar diversas análises. |
| Quais são as moléculas fluorescentes usadas na PCR em tempo real? | Os sistemas de emissão de luz, sonda TaqMan e Sybr Green. |
| Na quantificação absoluta, para o PCR em tempo real? | O número total de cópias do produto do PCR é obtido após comparação com uma curva padrão. |
| Na quantificação relativa, para o PCR em tempo real? | O sinal da sequência de interesse é comparado com o de um controle. |
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