Tecnicas de Biologia Molecular Aplicadas a
Biotecnologia Alimentaria
Estas tecnicas fueron aplicadas en el analisis de jugo de
mora en las siguientes muestras
Jugo de mora con stevia
Jugo de mora con stevia
pasteurizado
Jugo de mora con stevia sin
pasteurizar
Jugo de mora con sacarosa
Jugo de mora con
sacarosa pasteurizado
Jugo de mora con
sacarosa sin pasteurizar
Tecnicas de biologia moleculas aplicadas en las muestras
Microfiltracion
Tangencial
Estuvo conformado por una bomba
centrífuga, para el suministro del flujo
tangencial; una bomba de desplazamiento
positivo, que condujo la alimentación y un
intercambiador de calor tubular, para el
control de la temperatura. Se mantuvo la
temperatura del jugo a 35°C, para evitar la
disminución de la aceptación sensorial del
jugo en estudio. La membrana empleada
durante la etapa de microfiltración posee un
tamaño de poro igual a 10nm, de 5kDa, área
de filtración de 0,33m2. Los ensayos de
microfiltración, se iniciaron en condiciones de
presión, a través de la membrana igual a
2,54bar y un flujo de permeado de 270L/hm2.
Dichos ensayos, se efectuaron a una
temperatura constante, con una presión
transmembranaria constante, una velocidad
tangencial constante y un tiempo
aproximado de 70 min.
análisis metabolómico
Se extrajo, dos veces por semana,
una porción de cada muestra
almacenada; el procedimiento, se
realizó en el interior de una
campana de flujo laminar. Las
muestras fueron preservadas en
tubos eppendorf de 1,5mL y
conservadas a -70°C. El día para el
análisis, todas las muestras fueron
descongeladas, centrifugadas
(14000rpm por 10 minutos),
diluidas con agua grado HPLC en
proporción 1:1 y trasvasadas a los
viales para introducirlas al UPLC.
Sistema CL-MS empleado
Los análisis fueron realizados
en un sistema de Cromatografia
Líquida de Ultra Alta
Resolución, temperatura seca
270° C, El espectrómetro de
masas fue equilibrado
previamente, con las soluciones
estándares correspondientes.
Los experimentos de
fragmentación inducida por
colisión MS2, se realizaron
utilizando la interfaz ESI
operativa, en el modo de ion
positivo, usando una velocidad
de barrido de exploración de
1/s y una rampa de energía de
colisión de 10 a 40 eV. La
temperatura de desolvatación
fue 330°C y el flujo de gas de
desolvatación de 350 L/h. Todas
las muestras fueron inyectadas
por triplicado, en dos réplicas
de forma aleatoria.