Extracción del DNA

Materiales y sustancias químicas
1. 1.Puntas para microppipetas
  1. 2.Microppipetas
    1. 3.Gradillas y tubos
      1. 4.Tubos eppendorf
        5.Buffer de lisis
        6.Cloroformo propanol
        7.Proteinasa K
        8.Fenol cloroformó
2. Equipos
  1. 1.Vortex
    1. 2. Centrifuga
      1. 3.Incubadora
  2. Estamos listos para la extracción de DNA
    1. Procedimiento Clave
      1. 1.Colocar la muestra de líquido amniótico en un eppendorf y centrifugar a 7000 RPM * 5 minutos
        2. Se extrae del eppendorf, el sobrenadante quedándonos el pellet
        3.Colocar en el eppendort 700 microlitros de solución de buffer de lisis
        4. Mezclarlo en un Vortex y llevar a la incubadora por una hora a 56° para que se active la proteinasa K
        5. Después Colocar 500 microlitros de fenol cloroformo y Re suspender por 10 minutos
        6. Por lo tanto se lleva a centrifugar por 10 minutos a 13.000 RPM de esto resultan 3 fases se retira el sobrenadante y en la fase del pedio están las proteínas
        7. Se traspasa el sobrenadante a un nuevo tubo eppendorf y realizamos lavados con fenol cloroformo hasta que no se observe la interfaz de proteínas
        8. Se precipita el ADN para esto se colocan 500 microlitros de isopropanol y centrifugamos
        9. Cuando lo retiramos de la centrifuga, observaremos el ADN al fondo, descartamos el sobrenadante y añadimos agua milli-Q para su conservación
        10. Se puede congelar a -20° o usarlo en otro procedimiento molecular

Next up

Extracción del DNA

Description

Resource summary

Media attachments

Similar

	Created by Jesús Edgardo Picón Díaz about 4 years ago