Fijadores que Contienen Formol

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Fijadores que Contienen Formol
  1. Funcionamiento del proceso de fijación tisular El órgano de este estudio ha comenzado ya su proceso de descomposición por lo que es fijado después de su extirpación con el fin de que se conserve de esta manera se observaran tanto el buen funcionamiento y estructura del órgano como la patología de esta.
    1. FIJACION Con la palabra fijación queremos indicar, en el campo de la Anatomía Patológica, el procedimiento mediante el cual detenemos la destrucción, la autólisis de las células y el material extracelular.
      1. CARACTERISTICAS DEL FORMOL
        1. La formalina pura es una solución concentrada al 40% del gas formaldehido en agua Se prepara una solución al 10% o al 15% (10 o 15ml de solución de formaldehido, 90ml de agua corriente para hacerla más alcalina).La fijación se realiza a temperatura ambiente y de un tiempo aproximado en 24-48hs aproximadamente. El volumen del fijador debe ser al menos diez veces el del tejido.
        2. EL FORMOL BUFFERADO
          1. Formol bufferado al 10% - 15% (10 o 15ml de solución de formaldehido, 90ml de agua corriente para hacerla más alcalina).  Cuando las piezas quirúrgicas son pequeñas o las muestras son obtenidas por aspiración y de no existir indicaciones de realizar frotis para citología, estudios inmunohistoquímicos o de microscopía electrónica que requieran fijación especial se colocarán inmediatamente en formol bufferado al 10% en una relación de10 a 1 fijador/muestra. Para una mejor fijación las piezas no deben exceder de un espesor de 3 mm y un tamaño de 3 x 2 cm.
          2. FORMOL O FORMALDEHIDO
            1. Es un fijador ampliamente usado por la buena preservación del tejido produce poca retracción tisular, es compatible con la mayoría de las tinciones histológicas. La fijación normalmente es de 24 a 48 h, aunque puede ser de 1 a 2 semanas. Si el tejido va destinado a histoquímica es suficiente con 12-24 h a 4ºC.
            2. La temperatura que se utiliza para fijar una muestra biológica se encuentra entre los 15 y 25°C.. Se hace excepción a la "Biopsia por Congelación", donde la solución de formol tiene una temperatura de 60°C para acelerar el proceso de fijación.
              1. El formol es quizá el único fijador cuyo mecanismo es conocido en detalle. Tiene un solo componente (formaldehído) y por ello la fijación única. La imagen microscópica que produce es el “estándar de oro”, reconocida por todos los patólogos. La mayoría de los métodos de tinción se crearon para tejidos fijados con formol. Es el fijador más barato que existe por lo tanto es de elección para los trabajos de rutina en Anatomía patológica. Es un buen fijador único que determina una moderado conversación de la estructura tisular. Por ser buen desinfectante y no endurecer excesivamente los tejidos. Provoca escasa retracción tisular
                1. DESVENTAJAS El cancerígeno con un nivel de toxicidad muy alto. La fijación con formol es un proceso muy lento y en tres etapas: penetración (muy rápida) que detiene la autolisis La unión covalente que es 12 veces más lenta que la penetración, y Afecta la recuperación del ADN, mARN y la eficacia de las pruebas moleculares y genéticas. La neutralización siempre es incompleta. El reciclaje aumenta la exposición.
                  1. Soluciones fijadoras simples que contiene formol
                    1. Formol Salino Se utiliza para prevenir el efecto osmótico que provoca el empleo de disoluciones de formaldehido en agua destilada
                      1. Se prepara añadiendo a la solución de formalina al 100% una pequeña cantidad de carbonato de calcio insoluble que queda depositado en el fondo del recipiente neutraliza esta sal el exceso de ácido fórmico
                      2. Soluciones fijadoras simples que contiene formol
                        1. Formol Tamponado. Se prepara de la siguiente manera, como amortiguador se emplea el tampón fosfato calibrado con ph de 7.00 a 7.22
                          1. Formol cálcico o solución de baker se prepara añadiendo cloruro cálcico al 1% a una solución formalina neutras al 10%
                          2. Formol-Acético-Alcohol (F.A.A): Se emplea normalmente en la fijación de tejidos vegetales. Aunque no preserva muy bien el citoplasma es un buen fijador para conservar las estructuras vegetales.
                            1. Para preparar 100ml: Alcohol etílico de 50-70º-----90 ml. Acido acético glacial-----------5 ml. Formaldehido 40%------------5 ml.
                            2. FIJADOR P.L.P: La solución fijadora PLP (peryodato, lisina, formaldehído) se emplea cuando se quiere una alta preservación de antígenos puesto que su principal capacidad de fijación se centra en los carbohidratos. Contiene peryodato sódico que oxida a los azúcares para formar aldehídos y la lisina forma puentes entre ellos, produciendo la fijación.
                              1. Lisina-HCl: solución 0.2 M en H2O destilada.   Fosfato disódico dibásico: solución 0.1 M en H2O destilada.   Tampón de fosfato sódico: solución 0.1 M en H2O destilada, pH 7.4.   Paraformaldehído: solución al 8 % en H2O destilada.
                              2. Liquido de Gendre: Es una variación que está especialmente diseñada para la fijación del glucógeno y pigmentos derivados de la hemoglobina. Se prepara por:
                                1. Se prepara de la siguiente manera: EN ALCOHOL ETÍLICO AL 70%.....................................80.0 ml. FORMALINA CONCENTRADA……………15.0 ml. ÁC. ACÉTICOGLACIAL……….7.5ml
                                2. Fijador de Bouin-Hollander: Es una variante del líquido de Bouin especialmente indicado para la fijación de los cilindros de biopsia de médula ósea la conservación, es de 48 horas sin que se produzca excesivo endurecimiento.
                                  1. ACETATO NEUTRO DE COBRE……2.5 gr. ÁC. PÍCRICO……4.0 gr. FORMALINA CONCENTRADA……10.0 ml. ÁC. ACÉTICO GLACIAL…1.5 ml. AGUA DESTILADA…100.0 ml.
                                  2. Fijador de Müller: Es la disolución acuosa de un fijador simple de dicromato potásico con la adición de sulfato sódico su importancia actual radica en que se emplea para fabricar los fijadores de Orth y de Zenker. Lo que llamamos solución madre. Está compuesta de:
                                    1. DICROMATO POTASICO……2.5gr. SULFATO SÓDICO……….1.0 gr. AGUA DESTILADA ………100.0 ml.
                                    2. Fijador de Orth: Se emplea exclusivamente en ciertas técnicas de fijación de tejido nervioso
                                      1. Solución stock de Orth: idéntica a la composición del fijador de Müller. En el momento de su uso se mezclan: SOLUCIÓN STOCK………90.0 ml. FORMULINA CONCENTRADA……10.0 ml.
                                      2. Solución de B-5 y Zenker-Formol (Liquido de Nelly): Ambas mezclas son en esencia casi idénticas.
                                        1. La solución de Zenker-formol contiene dicromato potásico y sulfato sódico.
                                          1. CLORURO MERCÚRICO……5gr. DICROMATO POTÁSICO…2.5 gr. SULFATO SÓDICO …………1 gr. AGUA DESTILADA C.S.P..100.0 ml
                                          2. La denominación B5 corresponde en realidad a una modificación de la de Zenker.
                                            1. CLORURO MERCÚRICO...12.0 gr. ACETATO SÓDICO…. 2.5 gr. AGUA DESTILADA C.S.P….200 ml
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