Generalidades de la
producion de embriones
bovinos en vitro
Historia: en 1920 ensayos en conejos, primer
nacimiento en 1950 Bovinos: en la Década de los 70,
primer nacimiento principio de los años 80.
Es una biotecnologia reproductiva
mejoramiento genetico
Por la cual se obtienen Embriones en laboratorio, que
pueden ser implantados en Útero de la hembra bovina
La colecta de oocitos puede ser
por: Aspiracion floicular por
ultrasonido, Laparoscopia via flanco
Laparotomia ventral o medial
tiene diferentes fases:
Sistemas de cultivo celular
Medios indefinidos
Contiene suero fetal
bovino: Que proporciona
nutrientes a los
embriones
El problemas mas frecuente al
utilizar suero fetal bovino. los
embriones sufren alteraciones
ultra estructurales , Síndrome
de ternero grande
Co cultivos con celulas somaticas,
que contribuyen al desarrollo
embrionario al remover sustancias nocivas
Medios semidefinidos
son medios donde no hay
co-cultivos y el Suero Fetal Bovino es
remplazado con albúmina sérica
bovina
La albúmina es una de las proteínas con
mayor presencia en el tracto reproductivo
de los mamíferos y se cree que tiene un
importante papel en la nutrición del
embrión
Medios definidos
Son sistemas libres de proteínas, donde la
Albumina Sérica Bovina es remplazada por
macromoléculas como el polivinil alcohol y
polivinilpirrolidona
Uso comercial limitado, en
investigacion
Maduración de oocitos in vitro
Las características
microscópicas del folículo
son importantes para
determinar el potencial de
maduración nuclear y
citoplasmática del oocito
Clasificaciones morfologicas
Calidad 1: cumulus compacto
presente, conteniendo más de
tres capas de células
Calidad 2: cumulus compacto
parcialmente presente con menos de
3 capas de células
Calidad 3: cumulus presente, pero expandido.
Citoplasma contraído con espacio entre la membrana
Calidad 4: oocito desnudo sin
células del cumulus
Capacitación espermática
Este proceso ocurre en el tracto genital de la hembra
por la remoción de los factores decapacitantes debido
a las interacciones que se establecen entre el
espermatozoide y los factores capacitantes
Preaparacion espermatica para la FIV
las técnicas mas utilizada en Separación de
espermatozoides son
swin up: os espermatozoides vivos son separados
de los muertos, del plasma seminal y de los
componentes diluyentes, por la motilidad
ascendente
Gradientes de percoll: el semen se centrifuga, pasándolo
por diferentes gradientes de concentración, para permitir
la separación de los espermatozoides vivos de los demás
constituyentes del semen, basándose en la diferencia de
densidades
Lavado expermatico
Fertilización in vitro de oocitos (FIV)
se debe proporcionar un ambiente apto
para que ocurra la capacitación
espermática y la fecundación
el medio más utilizado es el FERT, que
contiene heparina para la capacitación
espermática.
El co-cultivo (espermatozoides-oocitos) es realizado por un período ente
18 y 22 horas, a una temperatura de 39ºC, en una atmósfera de 5% de CO2
Cultivo de embriones in vitro (CIV)
los oocitos fertilizados son sometidos a la etapa de cultivo. El
objetivo de esta etapa es permitir que, los oocitos fertilizados se
desarrollen hasta un estadio embrionario en el que se pueda
realizar la transferencia a la receptora.