Validación de técnicas para detección
de sangre, sangre humana y grupo
sanguíneo ABO
MATERIAL Y MÉTODO
Muestras, soportes y condiciones
Se tomó muestra de
sangre por punción
venosa en tubo con
anticoagulante
EDTA
Se realizaron
manchas sobre
varios tipos de
tela
Se expuso a una
temperatura de
-20°, 4°, 37° y 60°
C por periodos de
tiempo de 24
horas, una
semana y un mes
Test de Piramidón,
Fenolftaleina, Luminol
Pretratamiento de las muestras
En tubos colocar un fragmento de la mancha y
agregar 1 ml de solución salina al 0.85%
Dejar reposar el tiempo necesario para separar
la mancha del soporte.
Test de Piramidón
A 3 gotas de muestra se le agregan 3 gotas de
los reactivos de Piramidón
(+) =coloración violeta, (-) = sin cambio de color
reactivos de Piramidón
ácido acético y perhidrol
Interferencia de sustancias
similares a la sangre
Se hicieron manchas sobre tela de
algodón de: frutas, verduras y otras
sustancias como vino tinto, salsa de
tomate, cafe y fluidos biológicos.
Test de Takayama
Muestras, soportes y condiciones
Con muestra de sangre se
realizaron manchas sobre
diferentes tipos de tela.
La muestra se expuso a diferentes temperaturas en diferentes
periodos de tiempo. En ambientes cerrados, abiertos y en un
recipiente con tierra negra
Sensibilidad de la prueba
diluciones seriadas a partir de 1/10, así: 1/100, 1/500,
1/1.000, 1/ 5.000, 1/10.000.
Test de Takayama
Se hace un raspado de la mancha para obtener escamas, estas se
colocan entre lámina y laminilla.
Se agrega por capilaridad una gota del reactivo de
Takayama dejando en reposo de 10 a 20 minutos. .
Se observó al microscopio con objetivo de 10X y 40X incluyendo
controles positivos y negativos
Determinación de sangre
humana en manchas.
Prueba de Inhibición de la aglutinación
Absorción - Elución
INTRODUCCIÓN
ESTUDIOS QUE SE PUEDEN
REALIZAR
identificación de sangre
proveniente de un ser
humano
grupo sanguíneo al que
pertenece
análisis de ADN
EVALUACIÓN DE
LOS ESTUDIOS QUE
SE REALIZAN
se sometieron muestras
conocidas a diferentes
condiciones de
temperatura
clase de soporte
dilución
ambiente
tiempo de exposición
DISCUSIÓN
El test de Piramidón demostró ser una excelente
prueba presuntiva en diferentes soportes y
condiciones
Cuando se compara la sensibilidad de los 3 test
presuntivos se observa que el más sensible es el
Luminol (Hasta 1/500.000) seguido de Fenolftaleina
(Hasta 1/5.000).
El test de Takayama se ve afectado cuando la muestra
ha sido expuesta a temperaturas altas sin importar el
tiempo de exposición
CONCLUSIONES
Pruebas confirmatorias no se ven afectadas por
condiciones de exposición de muestras o el
soporte pero su sensibilidad es baja
El Luminol se constituye como la prueba más
apropiada en el estudio de posibles manchas
de sangre sobre los test de Piramidón y
Fenolftaleina