TINCION PARA CROMATINA SEXUAL

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DESCRIPCION CORTA DE TINCIONES USADAS EN GENETICA PARA VER IDENTIFICAR Y ORGANIZAR LA CROMATINA SEXUAL.
Camilo  Bautista
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Camilo  Bautista
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TINCION PARA CROMATINA SEXUAL
  1. Fucsina
    1. Es uno de los colorante nucleares mas energeticos, Forma parte de la coloración tricrómica de Mallory donde se utiliza para colorear núcleo y citoplasma
      1. 1. Aplica Fucsina durante 10 minutos
        1. 2. Se lava y escurre.
          1. 3. Se decolora en alcohol al 70% 10 minutos
            1. 4. Se lava y escurre.
            2. Robert Feulgen, en 1914, describió un método para revelar por tinción el ADN, basado en el colorante fucsina
            3. Aceto-Orceina
              1. Tiene afinidad por el ADN ya que se une a la carga negativa del fosfato
                1. 1. Se realiza la fijación por calor
                  1. Con esta técnica de tinción se ven los cromosomas impregnados por la orcina en color morado y el resto de las estructuras celulares de otro color.
                    1. 2. Se aplica Orceina durante 5 minutos
                      1. 3. Se lava y escurre
                    2. Giemsa
                      1. Permite observar y diferenciar el núcleo y el citoplasma, estos se tiñen de forma homogénea y distinta cada uno, se pueden agrupar según su forma
                        1. 1.Se aplica Giemsa y encima Bufer durante 30 minutos
                          1. 2. Lavar y secar
                          2. ideada por el alemán Gustav Giemsa, los mejores resultados se obtienen en muestras fijadas con formol
                          3. WRIGHT
                            1. El frotis sanguíneo una vez seco, se somete a un proceso de fijación y posteriormente a una tinción mediante un colorante adecuado
                              1. los ácidos nucleicos se tiñen con azul B que es el básico y la hemoglobina con la eosina Y que es ácida
                                1. 1. Cubrir toda la superficie con wright 2-3 minutos
                                  1. 2. Agregar amortiguador (pH 6.4) s. La cantidad de buffer debe ser suficiente para cubrir la lámina completamente. (2.5 ml para láminas)
                                    1. 3. oplar suavemente el extendido para mezclar hasta obtener una película uniforme de apariencia metálica - verdosa. Esperar 7 minutos
                                      1. 4.El lavado debe ser rápido (5 - 30 segundos) para evitar precipitación del colorante sobre la superficie del extendido. dejar secar al aire
                                    2. CAMILO A. Bautista R. 16171050
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