Práctica enzimas mitocondriales

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p´ractica de enzimas mitocondriales

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Práctica enzimas mitocondriales
  1. 1.Tomar una muestra de aproximadamente 5g de tejido libres de sangre o tejido adiposo y colocarlos en un mortero con arena lavada
    1. 3. Transfiera la mezcla a un Erlenmeyer de 50ml y manténgalo en nevera por espacio de 15 minutos, mezclando cada cinco minutos.
      1. 7. Prepare una serie de tubos debidamente rotulados acorde con la Tabla 2.
        1. 9. Inmediatamente agite muy bien y colóquele el aceite mineral.
          1. 6. Observe y anote los resultados obtenidos en cada tubo cuando aparezca el complejo coloreado
            1. 5. Prepare una serie de tubos debidamente rotulados acorde con la Tabla 1.
              1. 4. Pase la muestra a tubos de centrífuga y centrifugue por espacio de 10 minutos después de esto mantener en nevera el tubo sin agitar hasta su posterior uso
                1. Tejido hepático, cardiaco y muscular fresco
                  1. 10. Tome como tiempo cero el momento en que colocó el extracto enzimático y anote el tiempo requerido para la decoloración de cada tubo (revisen cada tubo entre tres a cinco minutos de intervalo).
                    1. 2. macere cuidadosamente hasta formar una masa suave adicionando poco a poco tres porciones (cada una de 5ml) de solución salina normal hasta completar un volumen aproximado de 15ml.
                      1. 8. Deje los tubos incubando a 37ºC mínimo por 10 minutos y sin retirarlos del baño serológico agregue el extracto enzimático (utilice básicamente el sobrenadante del tubo de centrifuga) acorde con la tabla No. 3
                        1. 11. Anote los resultados de cada tubo.
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