Análise proteômica: eletroforese, cromatografia e espectometria

MOLÉCULAS ISOLADAS DE MATERIAIS BIOLÓGICOS

ELETROFORESE BIDIMENSIONAL

FOCALIZAÇÃO ISOELÉTRICA CONVENSIONAL (IEF)

MIGRAÇÃO DE MOLÉCULAS EM GEL DE POLIACRILAMIDA

GRADIENTE DE PH IMOBILIZADO

TAAMPÕES ANFOTÉRICOS

SEPARADAS DE ACORDO COM SUA MASSA MOLECULAR

BANDAS OU SPOTS PROTÉICOS VISÍVEIS

GÉIS CORADOS

DIGITALIZAÇÃO DE IMAGENS DOS GÉIS

OS SPOTS SÃO COMPARADOS, ANALISADOS E QUANTIFICADOS ESTATÍSTICAMENTE

CROMATOGRAFIA LÍQUIDA

ANALITO DISSOLVIDO SEM INTERAGIR QUIUMICAMENTE

ANALITOS IDENTIFICADOS POR ESPECTOMETRIA DE MASSAS

ÍONS PEPTÍDICOS OU PROTÉICOS SÃO GERADOS TRANSFERINDO PRÓTONS PARA O GERADOR DE MASSAS

ÍONS PASSAM PELO DETECTOR CONECTADO A UM COMPUTADOR

ANÁLISE DE DADOS

PRINCIPAIS MÉTODOS DE IONIZAÇÃO PROTEÔMICA

MALDI (MATRIX-ASSISTED LASER DESORPTION/IONIZATION)

ESI (ELETROSPRAY IONIZATION)

PEPTÍDEOS SÃO COCRISTALIZADOS COM UMA MATRIZ ORGÂNICA

BOMBARDEAMENTO A LASER

MATRIZ SUBLIMA TRANSFEREM ÍONS PARA OS ANALITOS

ANÁLISE DE PROTEOMA D EBAIXO PESO MOLECULAR E CARÁCTERÍSTICAS CROMATOGRÁFICAS E BIOFÍSICAS DAS PROTEÍNAS

OBTENÇÃO DE DADOS DE MASSAS DE PROTEÍNAS DOS TECIDOS BIOLÓGICOS

SOLUÇÃO AQUOSA COM ANALITO É FORÇADO A PASSAR EM AGULHA COM ALTA VOLTAGEM

SOLUÇÃO É EJETADA QUE GERAM FORMAS IONIZADAS DE ANALITOS APÓS EVAPORAÇÃO DO SOLVENTE POR UM GÁS INERTE AQUECIDO