Fracionamento de proteínas com solventes orgânicos

Fracionamento de solvente orgânico

O fracionamento de solvente orgânico se baseia em diferenças na solubilidade das proteínas em soluções aquosas contendo solventes orgânicos miscíveis em água, como etanol, acetona e butanol. A adição de solvente orgânico efetivamente 'dilui' a água presente e reduz a constante dielétrica. Ao mesmo tempo, as moléculas de água são implantadas para hidratar as moléculas de solvente orgânico, removendo assim as moléculas de água dos grupos carregados e polares na superfície das proteínas. Este processo gradualmente expõe mais e mais grupos de superfície carregados e leva à agregação de proteínas devido às interações de carga (iônicas) entre as moléculas. Consequentemente, as proteínas precipitam em ordem decrescente do número de grupos carregados em sua superfície conforme a concentração de solvente orgânico é aumentada.

Purificação baseada em solubilidade

As proteínas diferem no equilíbrio dos aminoácidos carregados, polares e hidrofóbicos que eles são exibidos em suas superfícies. Grupos carregados e polares na superfície são solvatados por moléculas de água, tornando a molécula de proteína solúvel, enquanto que os resíduos hidrofóbicos são mascarados por moléculas de água que são necessariamente encontradas adjacentes a estes regiões. Uma vez que a solubilidade é uma consequência da solvatação de grupos carregados e polares nas superfícies da proteína, segue-se que, sob condições fixas particulares, as proteínas serão diferentes em suas solubilidades. Em particular, é possível explorar o fato de que proteínas precipitam diferencialmente da solução após a adição de espécies como sais neutros ou solventes orgânicos ('salting out', fracionamento de solubilidade).