Microcultivo de fungos: execução e leitura

Primeiro passo é inocular os fungos.

Após a inoculação, observe a coloração no verso da placa, pois os fungos produzem melanina na parede celular

A placa contaminada deve conter fungos crescidos, jovens e isolados no meio de cultura

Sempre trabalhe com a execução do microcultivo atrás da chama, evitando o mínimo de contaminação

Utilizando a placa de microcultivo, coloque a lâmina em cima do suporte, e depois adicione um pedaço do meio de cultivo Agar Batata sobre essa lâmina.

O meio de cultivo agar batata que é relativamente pobre, deve ser cortado e recolhido com uma espátula e cuidadosamente deve ser colocado sobre a lâmina

Inocule o fungo atrás da chama. Raspe com auxílio de uma alça cuidadosamente por alguns segundos e depois passe a alça nas extremidades do meio de cultivo que se encontra sobre a lãmina

Coloque a lamínula cuidadosamente sobre a meio de cultura que está em cima da lâmina

Adicione água destilada estéril para no algodão o umidificando criando assim uma câmara úmida. Depois coloque a placa na estufa com 28°c por 7 dias, mantenha sempre o algodão úmido para deixar sempre o ambiente também úmido

EXECUÇÃO

DO

MICROCULTIVO

LEITURA

Após o 7° dia o fungo cresce, mas depende de qual fungo alguns podem demorar até 11 dias.

Depois do tempo de crescimento e lateralmente pode se observar que formou um micelo

Com uma lâmina limpa e nova coloque 3 gotinhas do azul de metileno, cuidadosamente pegue a lamínula que estava na outra lamina contaminada e coloque em cima da lamina nova e aguarde para que com que o fungo core

PREPARO DA 2ª LÂMINA

Na lamina contaminada retire o meio de cultura e adicione gotas de azul de metileno sobre o fungo crescido, depois coloque uma lamínula sobre essa mesma lamina.

Se houver excesso de corante, aproxime com cuidado um pedaço de papel toalha para que ele absorva o azul de metileno

Após alguns segundos de secagem do corante pode se observar os fungos nas objetivas de 4x, 10x e 40x respectivamente e pode se identificar os fungos

Se quiser conservar essas laminas basta passar esmalte incolor por volta de toda a lateral da lamínula