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Análisis Microbiológico de agua

Fase presuntiva

Tomar 3 series de 5 tubos de caldo lactosado

Inocular cada serie Serie 1= 10.0ml serie2= 1.0 ml y serie3= 0.1 ml

Agitar por vigurosamente 25 veces

Incubar a 35 C por 24 hrs y observar crecimiento

En caso no hay crecimiento incubar nuevamente por 3 hrs a 48 C y observar crecimiento y gas

Reportar Negativo: no cambios despues de ser incubados y positiva presencia de crecimiento y gas

Fin

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Fase presuntiva de la presencia de coliformes totales

Por cada tubo positivo inocular una asada de caldo Bilis Verde Brillante

Incubar por 24 hrs a 44C, Posterior observar crecimiento y gas

A partir de esos tubos sembrar 1 caja de agar e incubar a 35 C por 24 hrs

Fin

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Identificacion de E.coli

Hacer un gram de colonias con brillo metalico

Observar presencia de bacilos Gram negativo

Inocular una bacteria para IMBIC con 1 colonia de agar EMB

Incubar 24 Hrs a 35 C

Fin

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Método del NMP Con medio LMX

Tomar muestra

usar equipo de proteccion y abrir y dejar correr agua

de 2-3 min, regular el grosor del agua,y con flujo constante

Destapar el recipiente de colecta y llenarlo

Fin

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Procesamiento de Mx

Agregar 10 ml de la mx a cada tubo de caldo LMX

Agregar 1ml de mx a cada tubo de LMX simple

Agregar 0.1ml DE MX a cada tubo se seriel mx Simple

Observar el color y medio

Incubar 36 C por 24 hrs

Observar la coloracion y un cambio de color verde azul es presencia

Observar con luz de UV si hay fluorescencia es indicativo de E.Coli

Los tubos positivos se confirman con rectivo de Kovacs

Agregar 4 a 5 gts de reactivo anillo rojo es confirmativo de E.coli

Fin

Procedimiento de Muestra

Metodo de NMP con medio LMX toma de mx

Identificacion de E.coli

Fase confirmatoria de Presencia de coliformes fecales

Fase presuntiva de la presencia de coliformes totales