INMUNIDAD, HIPERSENSIBILIDAD E INMUNOFLUORESENCIA

HIPERSESIBILIDAD

Lesión tisular mediada por el sistema Inmunitario donde hay una reacción excesiva o perjudicial frente a un antígeno

Son la base de los trastornos autoinmunitarios

Sucede más en personas sensibilizadas

Generalidades

Desencadenadas por antígenos exógenos y endógenos capaces de activar reacciones inmunitarias

Desequilibrio entre los mecanismos efectores y los de control que limitan

Enfermedades por hipersensibilidad se desarrollan con ayuda de herencia genética

Mecanismos de lesión tisular son los mismos efectores de la defensa

Clasificación de las enfermedades

En función del mecanismo inmunitario que medie la enfermedad

Hipersensibilidad Inmediata (Tipo I)

Hipersensibilidad por anticuerpos (Tipo II)

Hipersensibilidad por inmunocomplejos (Tipo III)

Hipersensibilidad por linfocitos T (Tipo IV)

Lesión por linfocitos TH2

Lesión por anticuerpos IgE

Lesión por mastocitos y basofilos con sus gránulos

ALERGIAS POR ALERGENOS

Lesión por anticuerpos IgG e IgM secretados

Lesión por el sistema del complemento

Fagocitosis o lisis

REACCIONES DE TRASFUSIÓN Y ERITROBLASTOSIS FETAL

Lesión por anticuerpos IgG e IgM que forman inmunocomplejos

Depositos de inmunocomplejos, sobre todo en sangre

Inflamación

LUPUS ERITEMATOSO SISTEMICO, VASCULITIS Y ARTRITIS REACTIVA

Lesión por linfocitos T sensibilizados (TH1, TH17, CTL CD8)

Inflamaciones crónicas y destructivas

Lesión por activación de fagocitos

ARTRITIS REUMATOIDE, DIABETES TIPO I Y ESCLEROSIS MULTIPLE

Tipos de hipersensibilidad

HIPERSENSIBILIDAD INMMEDIATA (TIPO I)

Reacción inmunitaria rápida a un sujeto previamente sensibilizado, llamada alergia y es provocada por alergenos

Ocurre como trastorno sistemático o reacción local

Reacciones locales

Alergias cutaneas-habones

Rinitis-conjuntivitis alérgica

Rinitis alérgica-asma bronquial

Las reacciones locales tienen 2 fases

Reacción inmediata

Reacción de fase tardía

Vasodilatación y aumento de la permeabilidad

Espasmo del músculo liso

Secreción glandular

Minutos después de la exposición al alergeno y desaparece en unas horas

Infiltración de tejidos por leucocitos y linfocitos T CD4

Destrucción tisular

Mecanismo de reacción inmediata

Respuestas excesivas de TH2, estimulando la secreción de IgE

2 a 24 h más tarde sin exposición adicional al alergeno y dura varios días

Activación del linfocito Th2 y producción de IgE

IL-4 actúa sobre los linfocitos B para diferenciarlo en clase IgE

IL-5 activa eosinofilos

IL-13 estimula la secreción de moco

Sensibilización y activación de los mastocitos

Receptor FcRI de alta afinidad en mastocitos y basofilos para IgE

Mastocito+IgE se exponen nuevamente al alergeno

Liberan mediadores potentes responsables de las características clínicas

Mecanismo de reacción de fase tardía

Reclutamiento de leucocitos que amplifican y mantienen la respuesta inflamatoria

Eosinofilos abundantes por Th2

Activación y liberación de enzimas proteoliticas que provocan daño celular

Mediadores de hipersensibilidad

Mediadores preformados

Aminas vasoactivas

Enzimas proteoliticas

Proteoglucanos

Mediadores lipídicos

Leucotrienos

Prostaglandinas D

Factor activador de plaquetas

Citocinas

TNF-Alfa

IL-1

Quimiocinas

Desarrollo de alergias por mecanismos genéticos

Predisposición a este tipo de hipersensibilidad por atopia

Gente atopica

Factores ambientales

Reacciones por alergia no atopicas

HIPERSENSIBILIDAD POR ANTICUERPOS (TIPO II)

Anticuerpos que reaccionan con antígenos presentes en las células sanas causando enfermedades por destrucción y disfunción celular

Tres formas de causar daño tisular

Opzonización y fagocitosis

Células revestidas por anticuerpos IgG

Inflamación

Disfunsión celular

Receptores Fc del fagocito para ingerir y destruir células

IgM e IgG en las superficie celular activan el complemento

Opzonización o lisis por MAC

Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos

Anticuerpos contra receptores celulares

Deterioran o alteran su regulación como en la miastenia grave

Puede estimular excesivamente en el receptor com en el hipertiroidismo del síndrome de Graves

Anticuerpos depositados en tejidos fijos activan al complemento

Libera sus subproductos quimiotacticos

Reclutamiento de luecocitos y migración al foco lesivo

Situaciones en las que ocurre

Reacciones transfusionales incompatibles

Eritroblastosis fetal

Anemia hemolítica autoimmune

HIPERSENSIBILIDAD POR INMUNOCOMPLEJOS (TIPO III)

Complejos antígeno-anticuerpo producen daño tisular desencadenando inflamación en zonas de depósito

Las enfermedades suelen ser sistémicas, generando glomerulonefritis, artritis, vasculitis, lugares frecuentes.

Enfermedad cel suero aguda es el prototipo secuela de sueros y anticuerpos exógenos; la crónica da lugar al LES

Fases de desarrollo

Formación de inmunocomplejos

Anticuerpos y antígenos presentes en la sangre lo forman

Depósito de inmunocomplejo

Se depositan en tejidos donde se filtra sangre de alta presión para formar otros líquidos

Orina y liquido sinovial

Inflamación y lesión tisular

Deposito de inmunocomplejos genera la inflamación aguda

Fiebre, urticaria, artralgias, linfadenopatia y proteinuria

Sistema del complemento activo

Morfología

Vasculitis aguda por necrosis y neutrofilia

Necrosis fibrinoide por todos los componentes

Microscopia inmunofluoresencia

Enfermedad local

Reacción de Arthus

Zona localizada de necrosis tisular por vasculitis aguda, desencadenada en la piel por inyección intracelualr de antígenos

HIPERSENSIBILIDAD RETARDADA (TIPO IV)

Inflamación por citocinas producidas por linfocitos T CD4 y muerte celular por linfocitos T CD8 por antígenos ambientales que causan enfermedades inflamatorias crónicas

Tres fundamentos esenciales

Inflamación por linfocitos T CD4

Reacciones secuenciales

Activación de linfocitos T CD4

Por APC y secretan IL-2 para expansión clonal

Diferenciación en TH1, TH2 y TH17 por citocinas de las APC

Respuestas de los linfocitos T efectores diferenciados

TH1 secreta IFN-γ responsable de la hipersensibilidad tipo IV

TH1 activa la vía clásica de los macrófagos M1 que liberan citocinas proinflamatorias

TH17 quimiocinas y otras citocinas para aumentar la inflamación

Citotoxicidad mediada por linfocitos T CD8

Matan a las células diana que tengan el antígeno intracelular

Utilizan perforinas y granzimas para inducir apoptosis

Producen IFN-γ y participan en las reacciones inflamatorias de HSR

Puede generar enfermedades autoimmunes sin control

Ejemplos clínicos de reacciones inflamatorias por LT CD4

Reacción a la tuberculina, un antígeno del bacilo de la tuberculosis

Inflamación granulomatosa por persistencia de del estimulo lesivo

Dermatitis por contacto por antígenos de hiedras venenosas que modifica las proteinas propias

Reacciones a los fármacos que generan estímulos proinflamatorios

GENERALIDADES INMUNIDAD INNATA

Presente y preparada para para proporcionar defensa contra microbios y eliminar células dañadas

Reconoce un numero limitado de Ag y no cambia su calidad contra ninguno

No tiene memoria ni especificidad

Tiene 4 fases

Reconocimiento de microbios y células dañadas

Activación de mecanismos efectores

Eliminación de sustancias no deseadas

Regulación y disminución de la respuesta inmunitaria

Componentes

Barreras epiteliales

Células fagociticas

Células dendriticas

Linfocitos NK

Sistema del complemento

Receptores celulares para PAM's y DAM's

Estructuras microbianas llamadas PAM's

Productos de células dañadas y necrosadas llamadas DAM's

Receptores reconocedores de patrones

En todos los compartimientos celulares

Receptores tipo Toll (TLR)

Receptores tipo NOD (NLR)

Receptores tipo RIG (RLR)

Reacciones

Inflamación (IL y TNF)

Defensa antivirica (IFN-1)

Señales de peligro que estimula la inmunidad adaptativa

GENERALIDADES INMUNIDAD ADAPTATIVA

Comprende los linfocitos y sus productos, lo que incluye los AC

Si tiene memoria y especificidad

Cambios notables en su magnitud de respuesta

Reconoce demasiados Ag

Es esencial para las vacunas

Hay dos tipos

Inmunidad celular

Inmunidad humoral

Activación de linfocitos T y eliminación de microbios intracelulares

Fundamentos

Linfocitos T CD4+ se diferencian en células efectoras que secretan diferentes grupos de citocinas

Los linfocitos T CD8+ se encargan de la citotóxicidad para eliminar células y secretan IFN-y

Activación de linfocitos B y eliminación de microbios extracelulares

Fundamentos

Al activarse, los linfocitos B proliferan y se diferencian en células plásmaticas que secretan diferentes clases de AC con diferentes funciones

La gran mayoría requiere ayuda de linfocitos T CD4+ para el cambio de isótopo y maduración de la afinidad de los AC

Disminución de la respuesta y memoria inmunitaria

Muerte por apoptosis después de que el microbio es eliminado (H.I)

Linfocitos T reguladores inhiben respuestas de los autoreactivos

La activación inicial de los linfocitos genera células memoria de vida larga, que sobreviven durante años después de la infección

Ig-BCR

TCR e HMC

CELULAS DEL SISTEMA INMUNITARIO

Conjunto de células que se combinan para encontrar y destruir las sustancias u organismos que causan las enfermedades.

Linfocitos

Específicos frente a un gran repertorio de Ag

Activación selectiva por Ag especificos frente a el (selección clónal)

Expansión para generar un gran repertorio del mismo (expansión clónal)

Tipos de linfocitos

Linfocitos T

Linfocitos Nk

Linfocitos B

Se desarrollan en el Timo a partir de precursores hematopoyecticos

Poseen un TCR que reconoce Ag pépticos que se presentan en MHC situados en las superficies de las APC

Tres poblaciones que cumplen diferentes funciones

T CD4+ cooperadores

T CD8+ citotóxico

T regulador

Matan a células infectadas y tumorales

Estimulan linfocitos B para producir AC

Limitan las respuestas inmunitarias

Activan leucocitos para que destruyan a los microbios por medio de citocinas

Secretan IFN-Y para activar macrófagos

Impiden las reacciones autoinmunitarias

Se desarrollan a partir de precursores presentes en la médula ósea

Únicas células del cuerpo capaces de producir moléculas de Ig, mediadores de la inmunidad humoral

Evolucionan a células plasmáticas, autenticas fabricas de AC

Se desarrollan a partir de precursores presentes en la médula ósea

Funciones efectoras similares a T CD8+ citotóxico

Usa enzimas granzima y perforinas para matar a las células infectadas

No poseen TCR

Fagocitos

Ingieren y destruyen los microbios y los tejidos dañados por medio de la inflamación y citocinas

Tipos de fagocitos

Neutrófilo

Principal tipo en respuestas inflamatorias

Respuesta rápida y vida corta

Fagocitar microbios (opsonizados) y productos de células necrosadas y destruirlos en los fagolisosomas

Monocitos

Se diferencian en macrófagos en los tejidos con foco de lesión

Macrófago

Ingerir microbios por fagocitosis y después matarlos

Ingerir células necrosadas, neutrófilos muertos y células apoptoticas

Secretan citocinas (TNF e IL-1) para la respuesta inflamatoria

Son APC a los linfocitos T

Promueven reparación de tejidos

Granulocitos

Contienen gránulos citoplasmáticos llenos de mediadores inflamatorios y antimicrobianos que se liberan después de su activación

Tipos de granulocitos

Mastocitos

Basófilos

Eosinófilos

Libera mediadores inflamatorios contra infecciones parasitarias y causan enfermedades alérgicas

Gránulos como histamina, el más importante

Expresan receptores para IgE y suelen estar cubiertos por ellos

Funciones similares a los mastocitos

Constituyen el 1% de los leucocitos sanguíneos

Gránulos con enzimas lesivas para las paredes celulares de los parasitos

Células dendriticas

Células residentes y circulantes

Inician reacciones inmunitarias innatas y adaptativas

Capturan Ag y son APC para los linfocitos T

Células centinela que secretan citocinas como respuesta

Presentan moléculas MHC I Y II

PATRONES DE INMUNOFLUORESENCIA

Técnica diagnóstica de microscopia, empleando anticuerpos conjugados con moléculas fluorescentes que aumentaron la especificidad y sensibilidad para la detección.

Actualmente, la técnica mas utilizada para la detección de los ANA es la IFI

Una muestra positiva para ANA, detectados mediante IFI, debe confirmarse mediante tecnicas mas sensibles y especıficas.

¿Que son los ANA?

Los anticuerpos antinucleares son Ig que reconocen componentes celulares autologos (nucleares y citoplasmáticos)

¿Que son los ANA?

Como ELISA, electro-inmunotransferencia (Western blot) u otras.

Tipos de ANA

ANA Naturales

ANA Infecciosos

ANA Autoinmunes

En niños y adultos mayores pueden estar presentes a tıtulos relativamente altos

Producidos en respuesta a estimulos antigenicos externos (infecciones)

Perdida de tolerancia inmunológica, carga genetica, interacción con el medio ambiente, etc.

La detección de los ANA se hace empleando como sustratos las líneas celulares HEp-2 que son un tipo particular de células de cultivo neoplásicas inmortalizadas

Los pacientes con enfermedades autoinmunes y reumáticas

Patrones de inmunofluoresencia

Se detectan por IFI en células HEp-2 en sueros de pacientes con enfermedades autoinmune.

Patrones nucleares

Dos tipos

Patrón homogéneo

Tinción homogénea en el núcleo, cuya intensidad puede variar dependiendo de la concentración de los anticuerpos presentes en el suero

Metafase compacta

Metafase delineada

Metafase difusa

Posiblemente den LES

Patrón periférico

Tinción regular alrededor del núcleo; el centro de este patrón muestra menos tinción

Casi exclusivo de LES

Patrón moteado grueso

Tinción núcleo se observa teñido con gránulos gruesos

Posiblemente en artritis reumatoide y síndrome de sjögren

Patrón moteado fino

Tinción núcleo se observa teñido con gránulos finos

Posiblemente en artritis reumatoide y síndrome de sjögren

Patrón centromérico

Los núcleos se tiñen con puntos finos distribuidos de manera homogénea en el nucleoplasma de las células en interfase.

Patrón nucleolar

Tinción intensa de los nucleolos y posiblemente en esclerosis sistémica

Patrón de la laminar

Tinción concentrada alrededor del núcleo y no se extiende hacia el citoplasma y A diferencia del patrón periférico, la placa de la cromatina en las células en división es negativa.

Patrón de la centriolar

Tinción intensa de los centriolos en células en división

Patrones citoplasmáticos

Patrón citoplasmático

Patrón del citoesqueleto

Tinción intensa homogénea que cubre todo el citoplasma

Tinción intensa en forma de hilos en el citoplasma

Posiblemente en enfermedades inflamatorias del músculo, enfermedades hepáticas y LES