Dosagem de proteínas: método de Bradford

Dosagem de Proteínas

Método de Bradford

É um dos métodos mais utilizados para realizar a dosagem de proteína, com faixa de detecção entre 20 e 2000 μg mL-1

Nesse método, é utilizado o corante de “Coomassie brilliant blue” BG-250, que interage com macromoléculas de proteínas que contém aminoácidos de cadeias laterais básicas ou aromáticas

Como reagente, pode ser utilizado a abulmina de soro bovino (BSA), que tem baixo custo

É uma análise laboratorial muito importante, especialmente na Medicina Veterinária

Pois verifica se existem alterações nas proteínas no sangue, o que pode indicar doenças renais ou hepáticas

O reagente azul brilhante de Coomassie altera a absorbância de 465 nm para 595 nm, o que causa uma mudança de coloração, de início castanha passando para tons de azul, conforme a concentração de proteínas.

A leitura da absorbância possui sensibilidade a partir de 1 μg de proteína e geralmente é realizada em espectrofotômetro ou leitor de microplacas, cuja intensidade da coloração é proporcional ao teor protéico da amostra.

O procedimento consiste em realizar a leitura de diferentes concentrações conhecidas de BSA para elaboração de curva padrão a partir da equação da reta e cálculo da quantidade de proteína presente

A comparação dos resultados com valores de concentrações conhecidos da curva padrão permite a determinação da concentração da proteína nas amostras em estudo

Amanaiara Mota

Bioquímica Metabólica 2021.1