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Métodos Estándar para el Examen de Agua y Aguas Residuales

Recuento de placas heterotrofas

Se usa inicialmente para medir la cantidad de bacterias pueden haber en un sistema de riego o lo que podria denominarse un tanque con agua

Las colonias se pueden clasificarse en pares, grupos o incluso individuales

se denominan unidades formadoras de colonias(UFC).

seleccion del medio

caundo las bacterias son muy pequeñas se puede hacer el metodo de placa vertido, Un baño de agua controlado termostáticamente es esencial para templar el agar, ya que tienen un crecimiento lento.

Método de placa extendida, consiste en todas las colonias están en la superficie del agar, donde los analisis a menudo pueden distinguirlos fácilmente de partículas y burbujas e identificar diferentes morfologías de colonias. De lo contrario, pueden

Transfiera rápidamente colonias e identificar

El metodo de filtración de membrana, se utiliza para las bacterias que se encuentran en bajo grado de turbidez, aunque sean grande cantidades de agua, no abstante puede tener un daño celular por las presiones ejercidad y la calidad del filtro.

El método de sustrato enzimático, es usada cuando se tiene una muestra de agua potable con variedad de bacterias, se hace metilumbeliferona emite fluorescencia cuando se expone a luz ultravioleta, se hace por el numero mas probable

Muetras

Técnica Estándar de Fermentación de Coliformes Totales

se puede presenciar las diferentes tipos de preparaciones de muestras, y sus medios de cultivos

agar m-HPC (anteriormente llamadoagar SPC), se usa para el recuento de bacterias heterotrofas en aguas tratadas como la potable

Agar R2A, se usa para bacterias en aguas tratadas

Agar NWR, es usado para los métodos de vertido en placa, en placa esparcida y de filtro de membrana

Este grupo de coliformes esta asociado a los generos de bacterias que pertenecen a la familia de Enterobacterias .

Es necesario el cumplimiento de pautas de garantia de calidad.

Control de calidad de agua potable

Para una prueba de aguas potables se debe tener en cuenta el inocular una serie de tubos ( multiplos y submultiplos de 10ml) de acuerdo a la densidad considerable de coliformes.

Medida de control, se establecio que al menos el 10% de las muestras de agua son positivos para coliformes totales, de acuerdo a la temporada.

Fase Presuntiva

Se usa el caldo Lauril Sulfato (triptosa), para la prueba de tubos multiples, por consiguiente se lleva a incubación toda la noche a temperatura ambiente

Procedimiento a llevar acabo

El número de filas y los volúmenes de muestra seleccionados dependen de la calidad y el carácter del agua a examinar

Se invierte los ingredientes deshidratados segun su tabla indicadora, se lleva a la placha de calientamiento mientras se homogeniza.

se lleva a esterilizar en el autoclave a 121°C durante 12 a 15 min.

agua potable 100ml

Para agua no potable, use cinco tubos por dilución de 10, 1, 0.1 mL.

el pH debe oscilar entre 6,8 y 0,2 despues de este procedimiento

crecimiento, gas y/o reacción ácida, presencia positiva

Fase Confirmada

para las muestras de aguas no potables ya no existe el requisito de que el 10% de todos los tubos positivos para coliformes totales

Cultivos de caldo BGLB positivos paralelos con cultivos de caldo EC o EC-MUG negativos indican la presencia de coliformes no fecales.

se usa caldo de fermentación,se usa el caldo bilis brillante.

Si los tubos presuntivos muestran una fermentación activa o reacción acida, se puede denominar fase confirmada.

Fase Completada

Establece y confirma la presencia de coliformes

los resultados positios considerados a una temperatura mayor (44,5°C) de todos los caldos ejecutados

Estimación de la Densidad Bacteriana

Uso de Límites (Exacto) tablas para determinar MPN

se pueden analizar 5 valumenes (10, 1, 0.1) se pueden encontrar positivos y negativos en las tablas

se puede calcular el MPN(Numero Más Probable)

Sabiendo la cantidad de muestra inoculada, el numero de tubos positivos, numero de disilusiones , la disilucion mas alta en un un tubo + y la cantidad de la muestra original inoculada en cada tubo en eljdilución.

. Precisión de la prueba de fermentación en tubos múltiples

no es exacta, por lo tanto es mejor cuando se toman por separado

las tablas son usadas para cliformes y MPN pero se pueden usar para cualquier organismo con medios bien ejecutados

fEscherichia coliProcedimiento con sustrato fluorogénico

Procedimiento para coliformes termotolerantes (fecales)

Prueba de coliformes termotolerantes (medio EC

se puede aplicar en agua potable, contaminación de corrientes, fuentes de agua cruda sin filtrar, sistemas de tratamiento de aguas residuales, aguas de baño, aguas de mar y monitoreo general de la calidad del agua

aislar coliformes termotolerantes

La presencia de E. colien el agua se considera un indicador específico de contaminación fecal y de la posible presencia de patógenos entéricos.

usando medio EC-MUG E. colise define como la especie de bacteria coliforme que posee la enzima - glucuronidasa, que puede dividir el sustrato fluorogénico

por el metodo de filtración de membrana

Prueba de sustrato enzimático

cumplir con las pautas de garantía de calidad

se puede analizar la cepa de coliformes T., E.coli, y una prueba negativa ) para confirmar la esterilidad y la falta de autofluorescencia.

. Interpretación

Colilert: si el color de la muestra es tan amarillo o amarillo más oscuro, es positivo para coliformes totales

Colilert-18: si el color de la muestra es tan amarillo o amarillo más, psoitivo oscuro

Colisure: si la muestra tiene un color rojo o magenta, es positiva para coliformes totales