Descalcificación del tejido óseo

Descalcificación del tejido óseo

1. Se denomina decalcificación a la completa eliminación de las sales Calcio presentes en los tejidos tras haber realizado su fijación.

2. Éste procedimiento se realiza de forma sistemática sobre tejidos mineralizados (dientes y huesos= y esporádicamente sobre material anatomopatológico con calcificaciones que puedan dificultar o impedir la observación al microscopio.

3. Decalcificación química

   • Los principales agentes descalcificadores están formados por ácidos fuertes o débiles empleados solos o en conjunción a distintos líquidos fijadores.
     • ÁCIDO NÍTRICO
       • El agente más rápido y eficaz es el ácido nítrico y se emplea en soluciones del 5 al 7.5%. El problema que tiene es que utilizado a concentración elevada, por encima del 6% es que tiende a producir gran destrucción tisular que se atenúa en disolución alcohólica.
     • SOLUCIÓN ACUOSA DE ÁCIDO NITRICO
       • Ac. Nítrico concentrado……………….5 mL Agua destilada……………… 95 mL
         • Ventajas
           • Provoca rápida deScalcificación. Causa baja retracción tisular.
         • Desventajas
           • La prolongación excesiva del tiempo de decalcificación suele anular la fijación previa y alterar progresivamente el tejido.
     • FORMULINA - ÁCIDO NÍTRICO:
       • Formalina ……………………..10 mL Ác. Nítrico concentrado …………..10 mL Agua destilada…………………. .80 mL
         • Ventajas
           • Es de acción relativamente rápida. Provoca menos alteraciones titulares que la solución acuosa de acido nítrico.
         • Inconveniente
           • Dificulta la tinción nuclear
     • SOLUCIÓN ACUOSA DE ÁCIDO FÓRMICO:
       • Acido fórmico al 90% ……………………..5-10 mL Agua destilada ……………..90-95 mL
         • Ventajas
           • Fija y descalcifica simultáneamente. No dificulta demasiado la coloración nuclear.
         • Inconveniente
           • Acción muy lenta

4. Cualidades de un descalcificante

   • Debe producir una eliminación completa de los depósitos cálcicos.
   • No debe provocar efectos indeseables o artefactos sobre los tejidos tratados.
   • No interferir con los procedimientos de tinción que se emplean posteriormente.

5. Decalcificación con quelantes químicos

   • Los quelantes químicos son sustancias capaces de combinarse con iones metálicos en solución o estabilizados en forma de sales o constituir nuevos compuestos generalmente solubles en agua.
     • El quelante que se utiliza normalmente que es el ácido etilendianinotetracetico.
       • Sal disodica de EDTA ……………………5.5 gr. Formalina neutra al 10% ……………………… 10.0 mL

6. Decalcificación electrolítica

   • Se basa en el empleo de una corriente eléctrica para provocar la ionización de la solución salina o descalcificante en que se encuentra sumergido el tejido de esta manera las sales insolubles de calcio presentes en el tejido son desplazadas hacia el electrodo negativo y los radicales ácidos hacia el polo electropositivo.
     • Este proceso suele realizarse entre 30 y 45°C y para especímenes pequeños.

7. Descalcificacion de bloques titulares incluidos en parafina

   • Durante el proceso de corte de los bloques incluidos en parafina, aparecen a menudo calcificaciones no detectadas.
     • Ácido nítrico al 10% 40 mL Etanol absoluto....30 mL Ácido crómico al 0.5% en agua destilada 30 mL
       • Ventajas
         • Prepara adecuadamente la tinción nuclear. Apenas provoca maceración tisular.

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