Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR)

Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR)

1. Método de laboratorio que sirve para hacer muchas copias de una porción específica de ADN a partir de una muestra que tiene cantidades diminutas de ADN. La reacción en cadena de la polimerasa hace posible la amplificación de esas porciones de ADN de manera que se puedan detectar.

   • La reacción en cadena de la polimerasa sirve para identificar determinados cambios en un gen o cromosoma, lo que quizás ayude a detectar y diagnosticar una afección o enfermedad genética, como el cáncer. También se puede usar para identificar porciones del ADN de determinada bacteria, virus o microorganismo, y ayudar a diagnosticar una infección. También se llama RCP.

2. Es una técnica de laboratorio desarrollada por el bioquímico Kary Mullis en 1985

3. ¿Cómo funciona el PCR?

   • Primero se calienta la muestra, para desnaturalizar el ADN
   • Segundo una enzima llamada polimerasa Taq sintetiza construye dos nuevas hebras de ADN, utilizando las hebras originales como plantillas.
   • Tercero una ves elaboradas las dos nuevas hebras, esta se dividen 30 o 40 veces mas para conceguir miles de ejemplares

4. Uso de la electroforesis en gel para visualizar los resultados de una PCR

   • La electroforesis en gel es una técnica en la que una corriente eléctrica impulsa fragmentos de ADN a través de una matriz de gel y los fragmentos de ADN se separan según su tamaño. Típicamente se incluye un estándar, o marcador de peso molecular, para que pueda determinarse el tamaño de los fragmentos en la muestra de PCR.
   • Los fragmentos de ADN de la misma longitud forman una "banda" en el gel que se puede identificar a simple vista si el gel se tiñe con un pigmento que se una al ADN. Por ejemplo, una reacción de PCR que produce un fragmento de 400400400400 pares de bases (pb) se vería así en un gel:

5. Tipos de PCR

   • PCR anidada
   • PCR de extensión solapada (Mutagénesis)
   • PCR in situ
   • PCR múltiple
   • PCR con transcriptasa inversa (RT-PCR)
   • PCR en tiempo real o PCR cuantitativo (qPCR)

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