Análisis de producto

Análisis de producto

1. Todos los productos farmacéuticos terminados se someten a rigurosas pruebas de control de calidad para confirmar su conformidad con especificaciones predeterminadas.

2. Contaminantes basados en proteínas

   • Además de las impurezas proteicas directas del material fuente, pueden introducirse otras proteínas durante el procesamiento upstream o downstream.
     • La implementación de buenas prácticas de fabricación (GMP) debe minimizar la contaminación de tales fuentes.
       • El significado clínico de las impurezas a base de proteínas se relaciona con:
         • Sus actividades biológicas potenciales
         • Su antigenicidad.
       • La mayoría de los pasos cromatográficos realizados durante el procesamiento posterior se incluyen para separar la proteína de interés de las proteínas contaminantes adicionales.

3. Eliminación de formas alteradas de la proteína de interés

   • La modificación de cualquier proteína generalmente alterará algún aspecto de sus características fisicoquímicas.
     • Esto facilita la eliminación de la forma modificada mediante técnicas cromatográficas estándar durante el procesamiento downstream.
       • La mayoría de los procedimientos incluyen tanto la filtración en gel como los pasos de intercambio iónico.
       • La desamidación y la oxidación hacen que su eliminación por intercambio iónico sea relativamente sencilla.
         • Tambien
           • La formación incorrecta de enlaces disulfuro, la desnaturalización parcial y la proteolisis

4. Potencia del producto

   • Evalúan directamente la actividad biológica del biofarmacéutico
     • El bioensayo implica aplicar una cantidad conocida de la sustancia a ensayar a un sistema biológico que responda de alguna manera a este estímulo aplicado. La respuesta se mide cuantitativamente
       • Todos los bioensayos son de naturaleza comparativa, lo que requiere un ensayo paralelo de una preparación "estándar" contra la cual se comparará la muestra.
         • Están disponibles en organizaciones como la Organización Mundial de la Salud (OMS) o la Farmacopea de los Estados Unidos.
           • Algunos tipos de ensayos son:
             • Ensayo tradicional para antibióticos
             • El bioensayo de EPO (Bioensayo basado en ratones)
             • Ensayo de inhibición del efecto citopático (Bioensayo para interferon)

5. Inmunoensayos

   • Los anticuerpos se emplean con frecuencia como reactivos de diagnóstico porque exhiben una especificidad extrema en el reconocimiento de un ligando particular
     • Las preparaciones de anticuerpos se usan a menudo en la detección y cuantificación de una amplia variedad de analitos específicos incluidas proteínas terapéuticas específicas

6. Determinación de la concentración de proteínas

   • Representa otro análisis estándar realizado por el control de calidad.
     • La detección y cuantificación de proteínas mediante la medición de la absorbencia a 280 nm es quizás el método más simple.
       • Rara vez se utiliza para determinar la concentración de proteína del producto final
     • Los métodos más comunes utilizados para determinar la concentración de proteínas son el procedimiento de unión de colorante que usa Coomassie azul brillante

7. Algunos otros métodos utilizados

   • La electroforesis en gel
   • Electroforesis capilar
   • Cromatografía líquida de alta resolución
   • Espectrometría de masas

8. Mapeo de péptidos

   • (Huella digital). La cartografía de péptidos implica la exposición del producto proteico a un reactivo que promueve la hidrólisis de los enlaces peptídicos en puntos específicos a lo largo de la cadena principal de la proteína.
     • Esto genera una serie de fragmentos de péptidos.
       • Una muestra estandarizada del producto proteico cuando se somete a este procedimiento dará como resultado una huella dactilar peptídica característica, o mapa, con la que posteriormente se pueden comparar los mapas peptídicos obtenidos con cada lote de producto.

9. Estudios de validación

   • La validación puede definirse como "el acto de probar que cualquier procedimiento, proceso, equipo, material, actividad o sistema conduce a los resultados esperados".
     • Plan maestro de validación